"HSC-T6 epithelioid cells大鼠肝星形細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞 SKMEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞 IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞 細胞生長:貼壁 HSC-T6 epithelioid cells大鼠肝星形細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2傳代 QGP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞 Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞 RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞 UWB1289細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 2780 CP細胞、Panc_05_04細胞、NCIH2081細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HSC-T6 epithelioid cells大鼠肝星形細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! H-1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21細胞、DAKIKI Clone 1細胞、U 266細胞 EC9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA hy 926細胞、COR-L 105細胞、McA-RH 8994細胞 SUM-102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞 SNK6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B1細胞、H69C細胞、CCC-HPF-1細胞 HCC-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞 Jurkat FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-1395細胞、KMY1022細胞、SNK6細胞 HEK 293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞 ATC241細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞 H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞 IA-LM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-19Lu細胞、H2009細胞、H-220細胞 HSC-T6 epithelioid cells大鼠肝星形細胞系 GM3190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞 CCRF-CEM C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞 CMT93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2細胞、HCS2/8細胞、SK.OV.3細胞 IPECJ2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞 B958細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞 NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞 NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞 MOLT16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞 Sf-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞 NCI-H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞 SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞 SNU-368細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML12細胞、MS 751細胞、5-8F細胞 Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞 SL-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞 NCI-H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞 CoCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞 L 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞 Tokyo Medical and Dental university 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞 T98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon38細胞、MMQ細胞、32D.cl3細胞 TK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞 GM07404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞 Institute for Medical Research-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞 MLO-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELF細胞、Hs 832(C).T細胞、Jiyoye (P-2003)細胞 HELF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞 Vero-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-513細胞、KMH-2細胞、PSN1細胞 PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞 IPEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞 HGE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs343T細胞、ECGI10細胞、A-2058細胞 Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞 BT-483細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞 SW480細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEpiC細胞、SK-LMS-1細胞、TK-1細胞 KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞 HT144mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435細胞、HPAF細胞、CHL1細胞 UCLA SO M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞 Hs68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞 FCCH1024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞 H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞 KM12SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞 HGC-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞 HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞 EOL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞 Hepa 1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞 SUM-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞 COLO 320 HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞 OVISE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細胞、H2087細胞、HM細胞 NCI H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞 QBC-939細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞 Mink Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞 HPAFII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞 HONE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞 OCI-Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m 14B細胞、Hs 578T細胞、P388.D1細胞 HSC-T6 epithelioid cells大鼠肝星形細胞系 751-NA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞 WEHI-279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31FUJ細胞、GT1-1細胞、CCD-33Co細胞 CEM/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2106細胞、7404細胞、RL-65細胞 SUM-102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZCRC1細胞、NCI-H322T細胞、AN3細胞 "
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