"BV-2 epithelioid cells小鼠小膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:源于C57BL/6小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞,表達(dá)核v-myc、染色體v-raf癌基因,表面表達(dá)envgp70抗原,在形態(tài)學(xué)、表型及功能上有吞噬細(xì)胞的特征。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 C2C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.T細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞 McA-RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1373細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 BV-2 epithelioid cells小鼠小膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細(xì)胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:6傳代;2-3天1次。 CCD-841-CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF (CF-1)細(xì)胞、LS513細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞 HUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QG-56細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞 NCI-H78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK LU 1細(xì)胞、PK-136細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞 ST細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞 Ku812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細(xì)胞、GC-2細(xì)胞、CD-18細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 BV-2 epithelioid cells小鼠小膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:半貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:多形型 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBdSMC細(xì)胞、IM95細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞 KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞 Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞 CV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 1112SK細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞 TMK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞 H-1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1-Lu細(xì)胞、ES2細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞 Hs 695.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC6細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞 BHP10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-SM細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞 SVOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-1-P細(xì)胞、HCC94細(xì)胞、B10BR細(xì)胞 SKMES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-04B細(xì)胞、MDBK細(xì)胞、GES1細(xì)胞 BV-2 epithelioid cells小鼠小膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 Lu-165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY A8細(xì)胞、HuO9細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞 SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞 RBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRTEC細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞 3T3NIH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LX-2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞 NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞 Hs-729-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞、MM96L細(xì)胞 Hs-729-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞、MM96L細(xì)胞 HEMCSS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STTG1細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞、RL95細(xì)胞 SUM159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH-82細(xì)胞、GM02132C細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞 10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM1A細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞 NMC-G1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB157細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞、PanC1細(xì)胞 HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞 TK10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY70細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞 BeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-5細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞 OE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞 hTERT-HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞 JROECL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞 SCL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 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HCC1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARIP細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞、MM6細(xì)胞 Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STC-1細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞、H-1882細(xì)胞 Hep-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細(xì)胞、T24細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞 RL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC90細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞、C22細(xì)胞 OVCAR8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4 Ig-24細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞、LN229細(xì)胞 DITNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES-1細(xì)胞、LU165細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞 HS-695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV29細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞 HS-695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV29細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞 C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞 MDA-MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞 CCD 841 CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320HSR細(xì)胞、CHP212細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞 TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞 OCI-Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 49F細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞 CCD 841 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