"CFSC-2G epithelioid cells鼠肝星形細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類(lèi)、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿(mǎn)意。具體過(guò)程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 NCIH1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST 486細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞、H-1299細(xì)胞 NUGC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞、H1703細(xì)胞 HCC95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 CFSC-2G epithelioid cells鼠肝星形細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來(lái)細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進(jìn)展,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建也是各個(gè)院校生物學(xué)科必備的實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)謹(jǐn)慎復(fù)雜,需要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備種類(lèi)繁多,下面就一些動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實(shí)際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿(mǎn)足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對(duì)細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和傳代;內(nèi)毒素含量過(guò)高,會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺(tái)/生物安全柜:細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌環(huán)境要求很高,在細(xì)胞操作時(shí),一般需要在100級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行,因此超凈工作臺(tái)或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細(xì)胞的凍存過(guò)程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過(guò)夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時(shí)就必須配備一臺(tái)-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月,對(duì)于不需要長(zhǎng)期凍存的細(xì)胞,可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。離心機(jī):細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞,所以需要配置低速的常溫離心機(jī),對(duì)于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材:細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見(jiàn)于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 Human Embryonic Skin細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BeWo細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞 GM05384細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE1細(xì)胞、MCF10-A細(xì)胞、SW403細(xì)胞 ND7/23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BA/F3細(xì)胞、LN229細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞 MA-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rin-M-5F細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞、UMR106細(xì)胞 KMS-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARH-77細(xì)胞、H-2110細(xì)胞、HME1細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 CFSC-2G epithelioid cells鼠肝星形細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話(huà)就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開(kāi)紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒(méi)用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專(zhuān)用儀器設(shè)備以及專(zhuān)用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專(zhuān)用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線(xiàn)顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買(mǎi)來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類(lèi)似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒(méi)了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤(pán)?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說(shuō)話(huà)聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞 NCI-H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sol8細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、H-2135細(xì)胞 P3X63 AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33細(xì)胞、P-2003細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞 OCI-Ly 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C細(xì)胞、F81細(xì)胞、P-3J細(xì)胞 SKMES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG63細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞、SW-982細(xì)胞 EFM192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、LS411N細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞 HCC1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-100細(xì)胞、NGEC細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞 SW962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375.S2細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞 MKN-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H820細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞 SNU-484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T.T細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞 CFSC-2G epithelioid cells鼠肝星形細(xì)胞系 Reuber H-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STO細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞、PL 5細(xì)胞 Detroit562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6細(xì)胞、OE-33細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞 A7r5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCol1細(xì)胞、HuH6細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞 EJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa-RG細(xì)胞、SNT8細(xì)胞、CORL105細(xì)胞 CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞 SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞 NCI-H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞 UK Pan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMEC細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞、RBE4細(xì)胞 NCIH2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTMC細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞、CAL148細(xì)胞 NCI-H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sol8細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、H-2135細(xì)胞 Panc 02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞 Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞 1.1B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-18細(xì)胞、GM637A細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞 CT-26 WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 697細(xì)胞、CAL33細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞 SUM159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS153細(xì)胞、KMH2細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞 KPL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2219C細(xì)胞、WC00044細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞 NCIH1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC1-SPG細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞 HBL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2-OS細(xì)胞、VSMC細(xì)胞、D324細(xì)胞 NCI-H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1668細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞 U-373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-132細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞、GS9L細(xì)胞 SUM-102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1651細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞 MC3T3-E1(C4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC subclone 11細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞、P388D1細(xì)胞 CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL40細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞 MES-SA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12A細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞、6-10B細(xì)胞 National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6E7細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞 COLO 320F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-402細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞 SW 962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly07細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞 WEHI 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細(xì)胞、H1793細(xì)胞、H647細(xì)胞 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1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞 LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2347細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞 T98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon38細(xì)胞、MMQ細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞 H1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HONE1細(xì)胞、L cell細(xì)胞、LY細(xì)胞 BJA-B-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES1細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞 KYSE510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eph4 1424細(xì)胞、AE1201細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞 MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31-FUJ細(xì)胞、HCGC細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞 OCM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-173細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞 SK.MEL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain KB細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞、95-D細(xì)胞 SUD6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1623細(xì)胞、RCS細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞 Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH3細(xì)胞、DrG細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞 H-446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251-MG細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞 CFSC-2G epithelioid cells鼠肝星形細(xì)胞系 MDAMB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-V細(xì)胞、H-596細(xì)胞、no-11細(xì)胞 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