"HEC-1-B epithelioid cells人子宮內膜癌細胞系 細胞背景資料:該細胞是H.Kuramoto1968年分離的HEC-1-A細胞亞株。不同於HEC-A-1的是:該亞株在培養(yǎng)第135天到190天之間表現(xiàn)出穩(wěn)定的生長周期,且重現(xiàn)扁平,與親本細胞系相比更具鋪路石式樣。此外主要染色體組是親本細胞的兩倍。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! TT細胞系相關產品:IEC 6細胞、no.11細胞、GM04154B細胞 FHs74Int細胞系相關產品:D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞 JIMT-1細胞系相關產品:TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞 細胞生長:貼壁 HEC-1-B epithelioid cells人子宮內膜癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次 OVCAR 420細胞系相關產品:Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞 NCI.H23細胞系相關產品:KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞 P3JHR1細胞系相關產品:CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞 AN3CA細胞系相關產品:MB 157細胞、C6661細胞、Rat podocyte細胞 H-2198細胞系相關產品:KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HEC-1-B epithelioid cells人子宮內膜癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 U118細胞系相關產品:HNE-2細胞、GM17346細胞、MRAEC細胞 HFL-1細胞系相關產品:CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞 Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關產品:Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞 MCA 38細胞系相關產品:MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞 RPMI-7951細胞系相關產品:HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞 Co-115細胞系相關產品:RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞 MM-1S細胞系相關產品:C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞 H82細胞系相關產品:FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞 Hs695細胞系相關產品:NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞 NTera 2/cl.D1細胞系相關產品:H-1155細胞、OVCAR432細胞、ssMCF-7細胞 HEC-1-B epithelioid cells人子宮內膜癌細胞系 EAHY-926細胞系相關產品:TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞 Panc 4.03細胞系相關產品:WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞 OCI-AML3細胞系相關產品:HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞 HUV-EC-C細胞系相關產品:B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞 WEHI-231細胞系相關產品:NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞 OCI-AML-5細胞系相關產品:SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞 OCI-AML-5細胞系相關產品:SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞 N-2a細胞系相關產品:SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞 MPC11細胞系相關產品:GalK 1細胞、H1238細胞、CF-PAC1細胞 McG-1細胞系相關產品:Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞 Hs 863.T細胞系相關產品:CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞 HIT T15細胞系相關產品:SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞 SF-763細胞系相關產品:CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞 LTEPsm細胞系相關產品:NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞 H-3255細胞系相關產品:HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞 HuNS1細胞系相關產品:HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞 U-343-MG細胞系相關產品:OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞 GM-3573細胞系相關產品:CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞 MC-4細胞系相關產品:SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞 10T1/2細胞系相關產品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞 9L細胞系相關產品:ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞 HeLa/DDP細胞系相關產品:COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞 Jijoye細胞系相關產品:D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞 Neuro 2a細胞系相關產品:A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞 Hs-695-T細胞系相關產品:H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞 SCH細胞系相關產品:SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞 Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關產品:FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞 Daoy細胞系相關產品:KMB-17細胞、UMRC-2細胞、Rat-2細胞 NBL-S細胞系相關產品:CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞 NK-92細胞系相關產品:WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞 OCILY10細胞系相關產品:HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞 Ramos(RA1)細胞系相關產品:IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞 Hep3B細胞系相關產品:P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞 RERFLCMS細胞系相關產品:DI TNC-1細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞 LN299細胞系相關產品:Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞 SW-527細胞系相關產品:293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞 SUM 149PT細胞系相關產品:3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞 PANC0327細胞系相關產品:3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞 mousepodocyte細胞系相關產品:HH [Human 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