"RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮細胞系
細胞背景資料：腫瘤抑制基因： p５３ + [PubMed: ９２１４６０５] pRB + [PubMed: ９２１４６０５] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的１８(HPV-１８)進行轉化，建立了RWPE-１ (ATCC CRL-１１６０９) 細胞株 [PubMed: ９２１４６０５]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時，在雄激素作用下，RWPE-１細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: １１１７０１４２]. 當與Matrigel或基質細胞混合注射雄性裸鼠時，RWPE-１細胞也能形成腺胞[PubMed: １１３０４７２４] 并產(chǎn)生PSA。 來源于RWPE-１的細胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-２細胞株(ATCC CRL-１１６１０) [PubMed: ９２１４６０５] 和 RWPE２-W９９ (ATCC CRL-２８５３) 細胞株。 另外，用N--N-(MNU)處理RWPE-１，建立了一系列模擬前列腺癌進程中不同時期的成瘤細胞株。 它們是 WPE１-NA２２ (ATCC CRL-２８４９), WPE１-NB１４ (ATCC CRL-２８５０, WPE１-NB１１ (ATCC CRL-２８５１) 和 WPE１-NB２６ (ATCC CRL-２８５２) 細胞株。 據(jù)提供者報道，RWPE-１ 細胞株(ATCC CRL-１１６０９)經(jīng)過檢測，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
CAL78細胞系相關產(chǎn)品：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞
ECC 10細胞系相關產(chǎn)品：LC1-Sq細胞、HCC-2218細胞、HEEpiC細胞
HEL-92細胞系相關產(chǎn)品：Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞
細胞生長：貼壁
RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代。
NCIH1793細胞系相關產(chǎn)品：D-324 Med細胞、GM04154B細胞、NCIH82細胞
MCM細胞系相關產(chǎn)品：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
32D/cl3細胞系相關產(chǎn)品：H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞
NCI-H125細胞系相關產(chǎn)品：J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
ARIP細胞系相關產(chǎn)品：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
Clone M-3細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞
FBHE細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
Ly19細胞系相關產(chǎn)品：CRFK細胞、SuperTube細胞、NB9細胞
SW962細胞系相關產(chǎn)品：A375.S2細胞、HTR-8/SVneo細胞、3T6-Swiss albino細胞
COLO-829細胞系相關產(chǎn)品：A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
NIH:OVCAR-8細胞系相關產(chǎn)品：X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞
NTERA-2/D1細胞系相關產(chǎn)品：RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞
JVM2細胞系相關產(chǎn)品：YES-2細胞、MES-SA/Dx-5細胞、SKHEP1細胞
HGC-27細胞系相關產(chǎn)品：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
CHP 100細胞系相關產(chǎn)品：PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮細胞系
ST細胞系相關產(chǎn)品：HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
L-M(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
CFSC-2G細胞系相關產(chǎn)品：H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞
Hs821T細胞系相關產(chǎn)品：ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞
H-23細胞系相關產(chǎn)品：L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞
JEKO細胞系相關產(chǎn)品：H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞
JEKO細胞系相關產(chǎn)品：H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞
BJA-B-1細胞系相關產(chǎn)品：GES1細胞、OVCAR-10細胞、SLMT-1細胞
H1666細胞系相關產(chǎn)品：Hs 888.Lu細胞、H-2122細胞、LA795細胞
NRK49F細胞系相關產(chǎn)品：SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
HSC4細胞系相關產(chǎn)品：H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞
MV-522細胞系相關產(chǎn)品：SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
143TK-細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)C細胞、SK Hep1細胞、WRL-68細胞
LM(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
SU86.86細胞系相關產(chǎn)品：NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞
NCIH2122細胞系相關產(chǎn)品：LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞
Hut292細胞系相關產(chǎn)品：H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞
B16-BL6細胞系相關產(chǎn)品：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
M-1細胞系相關產(chǎn)品：HEEpiC細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、RPMI7951細胞
IBRS-2細胞系相關產(chǎn)品：Lewis Lung Cancer細胞、OV2008細胞、NCIH1092細胞
A101D細胞系相關產(chǎn)品：SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞
G422細胞系相關產(chǎn)品：SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
HCC1500細胞系相關產(chǎn)品：OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞
HR-1細胞系相關產(chǎn)品：HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞
hTERT RPE1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
SW1463細胞系相關產(chǎn)品：H69細胞、SF539細胞、TE1細胞
H-23細胞系相關產(chǎn)品：L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞
PTK 2細胞系相關產(chǎn)品：COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞
MC 116細胞系相關產(chǎn)品：GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞
NCI-460細胞系相關產(chǎn)品：CAL12T細胞、GFP-Olig2細胞、MKN-7細胞
D283 Med細胞系相關產(chǎn)品：253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞
Hs-606-T細胞系相關產(chǎn)品：SKES1細胞、NCIH1838細胞、LP-1細胞
Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關產(chǎn)品：EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞
ChaGo-K-1細胞系相關產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
NCI.H23細胞系相關產(chǎn)品：KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞
SCL-I細胞系相關產(chǎn)品：WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞
COLO 320細胞系相關產(chǎn)品：THLE-2細胞、UM-UC-3細胞、NCI-H1876細胞
MDA157細胞系相關產(chǎn)品：Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞
MDA157細胞系相關產(chǎn)品：Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞
Colo-206F細胞系相關產(chǎn)品：Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、V-79細胞、NCI-H1930細胞
HEK-293A細胞系相關產(chǎn)品：ECV-304細胞、U-373 MG細胞、KPL-4細胞
CHO-K1細胞系相關產(chǎn)品：V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞
PL12細胞系相關產(chǎn)品：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞
BHK 21細胞系相關產(chǎn)品：NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞
NP-69細胞系相關產(chǎn)品：H-4-II-E細胞、Huh7.5細胞、NCIH1105細胞
Jurkat Clone E6-1細胞系相關產(chǎn)品：CNE2Z細胞、D-324MED細胞、RIN-m細胞
H.Ep. #2細胞系相關產(chǎn)品：H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞
NCC-IT細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2198細胞、MGHU1細胞、SUP-T1細胞
BV173細胞系相關產(chǎn)品：RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞
HSC-3細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞
MSF細胞系相關產(chǎn)品：H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞
RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮細胞系
HUT 125細胞系相關產(chǎn)品：LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞
NK92MI細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 450細胞、HSCT6細胞、Clone 15 HL-60細胞
HEK/293細胞系相關產(chǎn)品：VMM5A細胞、HSAS4細胞、H1688細胞
Ly19細胞系相關產(chǎn)品：CRFK細胞、RCC23細胞、VP 229細胞
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