"UM-UC-3 epithelioid cells人膀胱移行癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 SW 1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7404細胞、P-388細胞、LTPA細胞 ASPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-144細胞、TE671/RD細胞、MFM223細胞 A 2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞 細胞生長:貼壁 UM-UC-3 epithelioid cells人膀胱移行癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細胞傳代方法:1:2傳代 C4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞 NCI747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞 Hs 445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OP9細胞、TK.10細胞、H-1963細胞 CATH.a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 12細胞、NCIADRRES細胞、SUP-M2細胞 HO-1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PGLH7細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、HUSMC細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 UM-UC-3 epithelioid cells人膀胱移行癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 Hs 729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞 PC 61細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞 TM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞 SJSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞 PA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞 HT-1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞 KATOIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞 SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞 Tu177細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞 NCI-H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞 UM-UC-3 epithelioid cells人膀胱移行癌細胞系 E304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞 ATN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞 GS9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse INsulinoma 6細胞、RAMOS2G64C10細胞、RGE細胞 SKHEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞 MDA-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞 IHC-ST1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞 IHC-ST1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞 SK-MEL-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY-1細胞、GM07404D細胞、Strain L-929細胞 HEC1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞 RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 266-4細胞、H-2195細胞、CCD-112 CoN細胞 H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL5細胞、H748細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞 YD15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞 He La細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞 Caco-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1 myeloid leukemia細胞、HLF細胞、J774細胞 HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞 201T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、KALS-1細胞、MDBK (NBL-1)細胞 HCT-FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞 mRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞 RT4-D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye(P-2003)細胞、IAR 20細胞、QSG-7701細胞 NIHOVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞 DR2R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞 BT483細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN-12C細胞、RPMI8226/S細胞、NCI-H1648細胞 MNNG-HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞 B16-F10--RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3(A31)細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、HO-8910PM細胞 RS4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞 LC-1 sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM/C1細胞、NCI-H1618細胞、Bac1 2F5細胞 PC 61細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞 SW1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞 L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞 Roswell Park Memorial Institute 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC PRF 5細胞、HuT-102細胞、GM02219細胞 OV1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H740細胞、SK-ChA-1細胞、UPCI:SCC154細胞 Hs 888.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞 IGROV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞 Kit225/K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J111細胞、GM00215細胞、OCI-AML4細胞 8305-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞 PASMCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞 MJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN細胞、NCI-SNU-119細胞、Jurkat-FHCRC細胞 RAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2279細胞、NCIH2122細胞、HM06.A1細胞 RAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2279細胞、NCIH2122細胞、HM06.A1細胞 LS174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung-65細胞、Ra #1細胞、P3/X63/Ag8細胞 KTA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞 CAL-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞 HPDE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞 HeLa-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞 NCIH2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-48細胞、MFE296細胞、KOPN8細胞 HEK 293 EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rca-B細胞、Hs 683.T細胞、CHL-CL-11細胞 D-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8細胞、138 MG細胞、SNU1040細胞 Hep G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-229細胞、GM05887細胞、SK-MEL28細胞 EFO-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞 Hs-281-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞 Sci-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞 UM-UC-3 epithelioid cells人膀胱移行癌細胞系 NCIH1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞 OVTOKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-65細胞、RBL細胞、A549/DDP細胞 HM06.A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H847細胞、Sp2/0細胞、P31/FUJ細胞 TM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174細胞、A673細胞、TB-1 Lu細胞 "
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