"CHO-K1 epithelioid cells中國倉鼠卵巢細胞系
細胞背景資料:1957年,PuckTT從成年中國倉鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細胞,CHO-K1是CHO的一個亞克隆。CHO-K1的生長需要脯酸。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
NCI-H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
SP-2/0-AG14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞
細胞生長:貼壁
CHO-K1 epithelioid cells中國倉鼠卵巢細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
細胞傳代方法:1:2傳代
RCC_7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞
OCI-AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞
BT-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET1A細胞、Eph4 1424細胞、G-292 clone A141B1細胞
M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞
WEHI-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CHO-K1 epithelioid cells中國倉鼠卵巢細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
細胞形態(tài)特性:上皮樣
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
58F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞
RL952細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-4:11細胞、IA-LM細胞、Sf-21細胞
HT 1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞
B16BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI193細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞、MSF細胞
H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
H283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 Bl細胞、beta TC6細胞、Gerner 7666細胞
bEnd3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞
GM03671C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞
NCIH889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞
Bat lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞
CHO-K1 epithelioid cells中國倉鼠卵巢細胞系
NRK49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
RC-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
Okayama University Medical School-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞
QGP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞
MOLT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
HHFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
OCI/AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞
SUM149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954細胞、hTERT RPE1細胞、HEK293-F細胞
CCD 1112SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞
251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞
3T3-L1 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
SNU-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
SW954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞
H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
RT4P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2細胞、DMS153細胞、FRhK-4細胞
BRL-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞
HMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞
Rat Skin 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M21細胞、B16BL-6細胞、CAL39細胞
SK-NMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T6細胞、PAI細胞、MAEC細胞
HARA-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞
PC-3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
HB611細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB(HCF)細胞
MCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞
MNNG/HOS Clone F-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞
HCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2B細胞、LAD-2細胞、Hs706T細胞
L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞
Ca759細胞系相關(guān)產(chǎn)品:130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
HT 1376.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞
G361mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞
X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞
SNU520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞
SAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞
N-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
Clone Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mia PACA 2細胞、MM134細胞、H660細胞
BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
HEK293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343-MG細胞、HIMEC細胞、Murine Carcinoma-38細胞
Tn-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞
TE 85.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
JIMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞
PLC-8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞
T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
CL 1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞
HEK 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs870T細胞、KYSE510細胞、PLA801-95C細胞
HOP92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.7細胞、OCI-Ly03細胞、KYSE-270細胞
HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞
M619細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細胞、PC-10細胞、UM-RC-2細胞
WiDr-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞
CHO-K1 epithelioid cells中國倉鼠卵巢細胞系
B16F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞
HCC 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy-ori 3-1細胞、NCI-H82細胞、RAW 264.7細胞
143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM2細胞、HRGEC細胞、H283細胞
HT 1376.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138細胞、UCLA-SO-14細胞、AC16 [Human hybrid]細胞
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