"KYSE-30 Cell:人食道癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：來源于一位６４歲，患有高分化的中段食管鱗癌的男性患者。
NCI-1155細胞系相關產(chǎn)品：GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞
PC-3M IE8細胞系相關產(chǎn)品：Vertebral Cancer of the Prostate細胞、MRC-V細胞、AML-12細胞
Baby Hamster Kidney-21細胞系相關產(chǎn)品：UMC-11細胞、SW527細胞、HCC4006細胞
RM1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KYSE-30 Cell:人食道癌細胞系
細胞的凍存：目前，細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCIH460細胞系相關產(chǎn)品：Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞
ST2細胞系相關產(chǎn)品：R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞
KM933細胞系相關產(chǎn)品：Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
MHCC97H細胞系相關產(chǎn)品：Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞
H-2195細胞系相關產(chǎn)品：H-226細胞、Hs683細胞、D324 Med細胞
細胞生長特性：貼壁
KYSE-30 Cell:人食道癌細胞系
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
alpha TC1 clone 6細胞系相關產(chǎn)品：Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞
HS 445T細胞系相關產(chǎn)品：MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞
NIT-1細胞系相關產(chǎn)品：NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞
HBMEC細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞
Hs742T細胞系相關產(chǎn)品：Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞
COR-L88細胞系相關產(chǎn)品：FLC-7細胞、JCA1細胞、H-1385細胞
BAEC細胞系相關產(chǎn)品：C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞
KYSE-30 Cell:人食道癌細胞系
Evsa-T細胞系相關產(chǎn)品：PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
3T3-L1 ad細胞系相關產(chǎn)品：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
R-1059-D細胞系相關產(chǎn)品：DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
CCC-HHM-2細胞系相關產(chǎn)品：CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
H-2087細胞系相關產(chǎn)品：PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
EFM192A細胞系相關產(chǎn)品：X63-Ag8-653細胞、HSC（Human Schwann）細胞、SU-DHL-8細胞
KTC-1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞
SUDHL8細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
SY5Y細胞系相關產(chǎn)品：DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關產(chǎn)品：PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞
H-1734細胞系相關產(chǎn)品：JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
UWB1289細胞系相關產(chǎn)品：A 2780 CP細胞、Panc_05_04細胞、NCIH2081細胞
C-4I細胞系相關產(chǎn)品：BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞
RCS細胞系相關產(chǎn)品：A375細胞、GM17219細胞、PANC3.27細胞
DAN-G細胞系相關產(chǎn)品：aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞
LN-229細胞系相關產(chǎn)品：RGCs細胞、786-0細胞、hSCC-25細胞
C32-mel細胞系相關產(chǎn)品：GLAG-66細胞、huH 1細胞、WEHI-279細胞
SKMel-5細胞系相關產(chǎn)品：WC00097細胞、Hepatoma-22細胞、HL-1細胞
MES 23.5細胞系相關產(chǎn)品：C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
NCI-H2085細胞系相關產(chǎn)品：L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞
JM1細胞系相關產(chǎn)品：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
KATOIII細胞系相關產(chǎn)品：NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
Panc-08.13細胞系相關產(chǎn)品：C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
16HBE140細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞
BC-009細胞系相關產(chǎn)品：MCF-7細胞、L-540細胞、Pt-K1細胞
GM-215細胞系相關產(chǎn)品：H2286細胞、KP-N-YN細胞、MonoMac 6細胞
NTERA2-D1細胞系相關產(chǎn)品：TGBC11TKB細胞、H378細胞、BT-549細胞
A-101D細胞系相關產(chǎn)品：OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
C8166-CD4細胞系相關產(chǎn)品：KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞
HConEpic細胞系相關產(chǎn)品：Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞
WM-239細胞系相關產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
NCI-SNU-601細胞系相關產(chǎn)品：U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞
C33-A細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
MCF7/WT細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB134VI細胞、MMAc-Serum Free細胞、C26細胞
L-cell細胞系相關產(chǎn)品：MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
SVHUC細胞系相關產(chǎn)品：H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞
HPDE細胞系相關產(chǎn)品：PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞
BV173細胞系相關產(chǎn)品：RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞
SNK-6細胞系相關產(chǎn)品：Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
CATH-a細胞系相關產(chǎn)品：M210B4細胞、HCFB（HCF）細胞、Hs-688A-T細胞
SW 839細胞系相關產(chǎn)品：EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
CBRH-7919細胞系相關產(chǎn)品：MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
H-1048細胞系相關產(chǎn)品：3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞
KYSE-30 Cell:人食道癌細胞系
CC-LP-I細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞
HSC細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
NW-38細胞系相關產(chǎn)品：Y3-Ag1.2.3細胞、BEAS-2B細胞、Mevo細胞
MDCK (NBL-2)細胞系相關產(chǎn)品：KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞
GM03671C細胞系相關產(chǎn)品：JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞
H69細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞
Panc 8.13細胞系相關產(chǎn)品：BC-3H-1細胞、TOV-112D細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞
MHCC-97細胞系相關產(chǎn)品：U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞
DR2R1610細胞系相關產(chǎn)品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
Lu-99A細胞系相關產(chǎn)品：P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞
RCC 7860細胞系相關產(chǎn)品：COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
LAPC4細胞系相關產(chǎn)品：EVSAT細胞、hTERT-RPE細胞、JROECL 33細胞
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關鍵字： KYSE-30 Cell:人食道癌細胞系
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