"DMS 53 Cell:人小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
SW 1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7404細胞、P-388細胞、LTPA細胞
SW 780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞
MDA.MB.435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞
LCLC-103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
DMS 53 Cell:人小細胞肺癌細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代，每周２-３次
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CCRF/CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
Walker/LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞
SKLMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞
McCoy B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞
細胞生長特性：貼壁生長
DMS 53 Cell:人小細胞肺癌細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞
AML12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞
FRTL-5 Cl 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8.653細胞、HUCEC細胞、MCF-7/AdrR細胞
EM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WISH細胞、BRL3A細胞、Mino細胞
H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU620細胞、BALB/3T3 clone A31細胞、NCI-H157細胞
HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
MDA-MB-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞
DMS 53 Cell:人小細胞肺癌細胞系
Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
COLO-320-DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GEO細胞、KYSE-520細胞、SW1353細胞
HCC 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞
NCI-H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gerner 7666細胞、HS-68細胞、B35細胞
HCT-FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
MS-751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
LMTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV細胞、MUM2B細胞、MOLM-13細胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞
Ramos 2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞
Ramos 2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞
MHCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞
HEP-3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞
L-cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞
SW 48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞
MHCC97L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞
RPMI-8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epithelioma-2細胞、CCRF-CEM細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞
LAN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82sclc細胞、207細胞、CFPAC細胞
CACO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞
RBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc.SF細胞、NK92MI細胞、H747細胞
JS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞
Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
143 B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-407細胞、ARO-81細胞、SKM-1細胞
TOV-112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞
Astrocyte type I clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞
TE-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞
HEK-293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞
CPA47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞
OCM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTV-1細胞、hTERTHME1細胞、CL-11細胞
FU-MMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
MNNGHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞
OCI-AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞
NCI-H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞
G401細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞
A-172 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞
C-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
MFE-296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞
HEL9217細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kato-III細胞、H1836細胞、TE 85.T細胞
CCFSTTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞
COR-L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞
COLO-320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-12細胞、LLCMK2細胞、SSP-25細胞
COLO-320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-12細胞、LLCMK2細胞、SSP-25細胞
U-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞
SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
DMS 53 Cell:人小細胞肺癌細胞系
OCI-Ly8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞
Panc 05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞
N-Tera-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞
Anip973細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
EFM192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞
SK_N_BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
PK-136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞
TE 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
RGC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞
MX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞
C26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
Hs 578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1171細胞、MRC-9細胞、IMR-32細胞
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