"PC-14 Cell:人肺腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:肺腺癌;男性 Walker-256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R細胞、EFM192細胞、MV(4;11)細胞 P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞 MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞 COLO 320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197.T細胞、WPMY1細胞、SK-MEL-2-LUC細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 PC-14 Cell:人肺腺癌細胞系 細胞凍存基本方法:1.細胞:選對數(shù)生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。2.計數(shù):按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液,計數(shù),令細胞密度達5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴(yán),必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SK Mel 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2細胞、H.Ep. No. 2細胞、GH3細胞 WM115-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞 SW-403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞 PC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞 Roswell Park Memorial Institute 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC PRF 5細胞、HuT-102細胞、GM02219細胞 細胞生長特性:貼壁 PC-14 Cell:人肺腺癌細胞系 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 H-2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞 NCI H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB9細胞、NK-92.05細胞、J45.01細胞 CALU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞 NCI H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞 50.B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV21G細胞、WIL2 S細胞、SW579細胞 GA-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3-L1細胞、HIEC-6細胞、K1細胞 H-661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4M細胞、MKN7細胞、HCC1359細胞 PC-14 Cell:人肺腺癌細胞系 CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞 H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞 X63-AG 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞 R 2 C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞 G422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞 HEMCSS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:STTG1細胞、SKCO 1細胞、RL95細胞 RCCJF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞 LNCaP-ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA 144細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞、P3HRI細胞 HMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞 HMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞 G-401細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞 SBC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞 SuDHL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.Bst細胞、LS-411細胞、ChaGo K-1細胞 Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞 CTLA4Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-H細胞、NCTC-929細胞、A2008細胞 AAV293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS1細胞、MLE12細胞、NCIH2171細胞 IFRS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞 H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞 MLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞 GM00637H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞 Super Tube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞 KU-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC14細胞、2008細胞、NKT細胞 MILE SVEN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞 FRTL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞 686LN-M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-2細胞、Dx5細胞、786-O RCC細胞 Z138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H520細胞、HeLa 229細胞、KATOIII細胞 U-2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM-38細胞、NCI-H2087細胞、SUM149-PT細胞 TE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF#1細胞、Rat podocyte細胞、OCI-Ly 1細胞 RPE-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1.6細胞、NTERA2細胞、D-283MED細胞 P116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH-22a細胞、DMS 114細胞、CHP 126細胞 786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞 RCC 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞 RBVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML2細胞、HDLM2細胞、HBZY 1細胞 MKN74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞 Huh-7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞 D-324 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-182細胞、HCT-116細胞、H2066細胞 McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞 801-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞 MDA-MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞 Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞 4T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞 Huh7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞 SK-LMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE1細胞、MDCC-MSB-1細胞、NCI-SNU-1細胞 PC-14 Cell:人肺腺癌細胞系 MDA.MB.435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞 U2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞 Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞 QBI-293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞 QGY7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343細胞、CX1細胞、AM細胞 rUCMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞 ARH 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞 CHL/IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞 TE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞 HOCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞 BPH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞 OLN-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA 01/04細胞、LA 4細胞、SCC4細胞 "
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