"OK Cell:負鼠腎細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：腎
KPL-1細胞系相關產品：GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞
NCI747細胞系相關產品：N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
SK-N-SH細胞系相關產品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞
BN-CL2細胞系相關產品：SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
OK Cell:負鼠腎細胞系
細胞凍存基本方法：１．細胞：選對數(shù)生長期細胞，收集細胞２４小時前換液一次。２．計數(shù)：按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液，計數(shù)，令細胞密度達５×１０(６)/ml，離心去上清，吸入離心管中。３．凍存液：先用培養(yǎng)液９分＋DMSO １分（或甘油）配成１０％的DMSO凍存液，按上法一滴滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。４．分裝：分裝入無菌安剖中，每安剖加１.５毫升細胞懸液。５．封口：用塑料安剖時擰緊瓶口即可；如用火焰封閉安剖口后，仔細檢查，定要封嚴，必要時可浸入藍色液中觀察，為安全起見，把安剖縫入紗布小袋中，以防液氮浸入后，融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人；紗袋一端系以線繩，末端扎有小牌，注明：細胞名稱，凍存日期，以便日后查找。細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCCC9810細胞系相關產品：Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞
SCLC-21H細胞系相關產品：SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞
A172細胞系相關產品：OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞
H-2286細胞系相關產品：WERI Rb-1細胞、LSC-1細胞、Hs-578-T細胞
SKO-007細胞系相關產品：HCC1833細胞、NBL-5細胞、HKBML細胞
細胞生長特性：貼壁
OK Cell:負鼠腎細胞系
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
293T/17細胞系相關產品：SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞
A10細胞系相關產品：SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞
H-929細胞系相關產品：C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞
SU-DHL-16細胞系相關產品：RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞
HEC-1A細胞系相關產品：Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞
SF 295細胞系相關產品：MDA-MB 453細胞、SW-1116細胞、HuP-T3細胞
WM 2664細胞系相關產品：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞
OK Cell:負鼠腎細胞系
293細胞系相關產品：NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞
HOPC細胞系相關產品：UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞
HNEpC細胞系相關產品：Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞
COLO679細胞系相關產品：EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞
TC-1[JHU-1]細胞系相關產品：OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞
GDM-1細胞系相關產品：MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞
SW-1463細胞系相關產品：HO1-N-1細胞、MCF.7細胞、BEAS2B細胞
F98細胞系相關產品：MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞
F81細胞系相關產品：UPCI-SCC-90細胞、Natural Killer-92細胞、BHK21細胞
A498細胞系相關產品：H-196細胞、C2-C12細胞、OSC19細胞
NCI-H1648細胞系相關產品：CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
32D/cl3細胞系相關產品：H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞
HTR8svn細胞系相關產品：HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞
H295R-S1細胞系相關產品：AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞
DSL-6A/C1細胞系相關產品：OVCAR-420細胞、MDA175細胞、A427細胞
SGC-7901/DDP細胞系相關產品：CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞
Ramos (RA 1)細胞系相關產品：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞
HCC-70細胞系相關產品：Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞
THP1細胞系相關產品：HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
HCT_116細胞系相關產品：RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
ketr 3細胞系相關產品：HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞
OEC19細胞系相關產品：TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關產品：T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
253J-Bladder-V細胞系相關產品：LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞
GM15452細胞系相關產品：Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
ECC 12細胞系相關產品：GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞
NCI-H460細胞系相關產品：SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
EL 4細胞系相關產品：L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞
MUTZ3細胞系相關產品：Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞
Human fetal lung fibroblast 1細胞系相關產品：OCI AML3細胞、LC-1 sq細胞、WM239細胞
KYSE 510細胞系相關產品：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
C17.2細胞系相關產品：U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞
NCI-SNU-407細胞系相關產品：CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞
NCI-SNU-387細胞系相關產品：Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞
LS513細胞系相關產品：OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞
KATOIII細胞系相關產品：NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
BHK-21細胞系相關產品：QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞
SCL-2細胞系相關產品：BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
BTI-TN5B1-4細胞系相關產品：HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞
MIA PaCa-2細胞系相關產品：NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
T. T細胞系相關產品：Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞
RS4:11細胞系相關產品：PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞
ATDC5細胞系相關產品：L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞
OK Cell:負鼠腎細胞系
H-2444細胞系相關產品：CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞
OCI-AML-2細胞系相關產品：PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞
NR8383.1細胞系相關產品：NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞
Balb/c 3T3細胞系相關產品：ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞
GM05372E細胞系相關產品：SNU423細胞、NBL-7細胞、L5178YR細胞
SU-DHL-1細胞系相關產品：DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞
COLO-357細胞系相關產品：SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞
Lieming Xu-2細胞系相關產品：HSC細胞、H810細胞、U251n細胞
SF295細胞系相關產品：H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
H1618細胞系相關產品：TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
H-711細胞系相關產品：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
LoVo細胞系相關產品：KYSE 270細胞、MFE 296細胞、SK-MEL-2細胞
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