"FRhK-4：恒河猴胚腎傳代細胞
細胞背景資料：胚胎；腎；自發(fā)永生；雌性
HHFK細胞系相關產(chǎn)品：HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
PCI:SG-231細胞系相關產(chǎn)品：SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
FRhK-4：恒河猴胚腎傳代細胞
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
EFM-19細胞系相關產(chǎn)品：SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
DCS細胞系相關產(chǎn)品：GM16136細胞、KMS-26細胞、DU_145細胞
CCD966SK細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
FRhK-4：恒河猴胚腎傳代細胞
細胞生長特性：貼壁
ROS1728細胞系相關產(chǎn)品：T_T_細胞、SW962細胞、SW 954細胞
HCT_116細胞系相關產(chǎn)品：RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
D324細胞系相關產(chǎn)品：IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關產(chǎn)品：Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
SW13細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞
H1568細胞系相關產(chǎn)品：MSTO-211細胞、NCIH1694細胞、H-676細胞
Hs578Bst細胞系相關產(chǎn)品：RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞
LM3細胞系相關產(chǎn)品：HCC1500細胞、UCLA-SO-M14細胞、H-35細胞
alpha TC1-6細胞系相關產(chǎn)品：Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
HMC-1細胞系相關產(chǎn)品：ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞
HCC15細胞系相關產(chǎn)品：FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞
L132細胞系相關產(chǎn)品：SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞
CESS細胞系相關產(chǎn)品：EFM-19細胞、B16 melanoma細胞、CaSki細胞
NCI-H1688細胞系相關產(chǎn)品：MOLT3細胞、P 3 HR 1細胞、CCD 1112SK細胞
LI7細胞系相關產(chǎn)品：BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞
Hs27細胞系相關產(chǎn)品：K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞
HGBEC細胞系相關產(chǎn)品：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
OVCAR.4細胞系相關產(chǎn)品：CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
FTC-133細胞系相關產(chǎn)品：SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
SBC-3細胞系相關產(chǎn)品：HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞
SBC-3細胞系相關產(chǎn)品：HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞
McA-RH8994細胞系相關產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
BEL-7405細胞系相關產(chǎn)品：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
MDCC-MSB1細胞系相關產(chǎn)品：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
NCI-BL2141細胞系相關產(chǎn)品：UO31細胞、H3255_DA細胞、HO8910/PM細胞
HPB/ALL細胞系相關產(chǎn)品：SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞
TE-4細胞系相關產(chǎn)品：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
MV-3細胞系相關產(chǎn)品：H1672細胞、Caco-2/BBe細胞、TGBC-11-TKB細胞
D324 Med細胞系相關產(chǎn)品：HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞
UM-RC-2細胞系相關產(chǎn)品：PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
FRhK-4：恒河猴胚腎傳代細胞
MV4:11細胞系相關產(chǎn)品：P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞
MDCK II細胞系相關產(chǎn)品：SC1細胞、G-292細胞、130 T細胞
BALB 3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品：MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞
P-388細胞系相關產(chǎn)品：ACC-3細胞、SKNBE2細胞、HLF細胞
IPLB-Sf21-AE細胞系相關產(chǎn)品：SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞
HET-1A細胞系相關產(chǎn)品：GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞
HPB-ALL細胞系相關產(chǎn)品：Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞
Li-7細胞系相關產(chǎn)品：NCTC clone 929細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、VM-CUB-I細胞
PK (15)細胞系相關產(chǎn)品：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
Hs 600.T細胞系相關產(chǎn)品：B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞
LLC-PK(1)細胞系相關產(chǎn)品：Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞
PTK 2細胞系相關產(chǎn)品：COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞
BL1339細胞系相關產(chǎn)品：L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關產(chǎn)品：MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
CC-LP-I細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞
JJN-3細胞系相關產(chǎn)品：HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞
H747細胞系相關產(chǎn)品：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
KLM-1細胞系相關產(chǎn)品：RPE1細胞、KALS1細胞、MEL細胞
G402細胞系相關產(chǎn)品：MOLP2細胞、TE353.SK細胞、PANC403細胞
Hs819T細胞系相關產(chǎn)品：HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
RS411細胞系相關產(chǎn)品：NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞
A549/DDP細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞
MESSA/Dx5細胞系相關產(chǎn)品：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
SHP77細胞系相關產(chǎn)品：HS-683細胞、PFSK細胞、TE-10細胞
U-373-MG細胞系相關產(chǎn)品：MC 3T3-E1細胞、WSU-DLCL-2細胞、PANC0327細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
SK-RC-20細胞系相關產(chǎn)品：CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞
SHI1細胞系相關產(chǎn)品：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞
PC-3M細胞系相關產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞
HMC3細胞系相關產(chǎn)品：LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞
MB 157細胞系相關產(chǎn)品：UPCI:SCC090細胞、Z-138細胞、Hepatoma 22細胞
Anip-973細胞系相關產(chǎn)品：D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞
HPAF II細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
H1341細胞系相關產(chǎn)品：T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
FRhK-4：恒河猴胚腎傳代細胞
C8166細胞系相關產(chǎn)品：T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
ARO81細胞系相關產(chǎn)品：SN12C細胞、SR-786細胞、SK-ChA1細胞
H2196細胞系相關產(chǎn)品：LA-N-6(OAN)細胞、ROS1728細胞、SW 1783細胞
Hs-578Bst細胞系相關產(chǎn)品：MN 60細胞、JTC-39細胞、MLA-144細胞
OVCAR8細胞系相關產(chǎn)品：NTera 2細胞、SUM 102細胞、NCTC 1469細胞
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關鍵字： FRhK-4：恒河猴胚腎傳代細胞;
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