"A-1847:人卵巢癌傳代細胞
細胞背景資料:卵巢癌;女性
WM-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞
SK-MEL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
如何進行細胞復(fù)蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調(diào)整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)?!緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復(fù)蘇的時候,有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
A-1847:人卵巢癌傳代細胞
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
CCD-841-CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF (CF-1)細胞、LS513細胞、HCoEpiC細胞
Tsup-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
OVCAR 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
A-1847:人卵巢癌傳代細胞
細胞生長特性:貼壁
KYSE 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞
LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞
GTL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
OVCAR.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非常考究你的功夫的!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
Granta 519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET-1A細胞、J 774A.1細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞
P30/Ohkubo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
SK-N-BE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/2.8細胞、CCD841CoN細胞、KYSE-410細胞
H-1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HIE-2細胞、BERH-2細胞、UCLA NPA871細胞
Kit225細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞
MILE SVEN 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
UPCI:SCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK1細胞、Lu99A細胞、HSC3細胞
Potorous tridactylus Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2BBe細胞、Eca-109細胞、H157細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞
RAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2279細胞、NCIH2122細胞、HM06.A1細胞
MC3T3-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-42細胞、LNCaP細胞、FLC7細胞
aNK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA8細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞、NALM-6-M1細胞
MKN45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
HEL-92-1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞
T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞
Huh 7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM(TK-)細胞、SuDHL 2細胞、UM2細胞
RAG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞
CAL 85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞
NCI-HUT-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
KE 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
GM00637F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMD-8細胞、H766T細胞、X63-Ag8細胞
MHCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞
SK-NM-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVSMC細胞、WM 2664細胞、SO-Rb 50細胞
HEC-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB/ALL細胞、SW-982細胞、H226細胞
A-1847:人卵巢癌傳代細胞
HEI-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNSC細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCI-H1819細胞
AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞
HP615細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
F442-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
Hs611T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ketr-3細胞、HAPI細胞、C-6細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
Ramos G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細胞、T-ALL-1細胞、MDA-MB-175VII細胞
HOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT(H9)細胞、GDM1細胞、EA. hy 926細胞
NCIH2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞
PK (15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
HSAS4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞
IAR20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞
HEK293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞
B16 subline B78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-2細胞、DMS-273細胞、CALU1細胞
MDA231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞
OCI-AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞
MDA-MB-134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML3細胞、LM-TK-細胞、NCI-H2087細胞
TYK-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
PL45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
HL-60 Clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
Caki-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA-87細胞、NCIH929細胞、GM-3573細胞
HCC 2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞
Jurkat-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞
H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞
SBC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞
Hs606T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
CHP-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
Hs 683.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC1細胞、RPTC細胞、HS5細胞
D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞
GM04679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞
MNNG/HOS Cl #5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞
SKGIIIA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain L-929細胞、MDAMB415細胞、H1672細胞
A-1847:人卵巢癌傳代細胞
NB-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞
UCLA RO-81-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 EBNA細胞、HuCC-T1細胞、GM17346細胞
NCI-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2171細胞、B-cell with DC Morphology細胞、AtT-20細胞
SK-N-BE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/2.8細胞、H711細胞、SU-DHL-10細胞
Anip[973]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat 77細胞、WM 266-4細胞、NCIH2286細胞
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上海弘順生物科技有限公司長期為高校和科研單位等提供優(yōu)良的科研產(chǎn)品,在生物化學(xué)行業(yè)內(nèi)獲得良好的客戶口碑。目前,公司提供近十萬余種科研產(chǎn)品,其中涵蓋化學(xué)、細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域。同時,我司不斷拓展產(chǎn)品種類,為用戶提供質(zhì)量更優(yōu)、價格更實惠的科研產(chǎn)品。 上海弘順生物科技有限公司 主營產(chǎn)品有: 1.生化試劑:上海弘順生物科技有限公司 在上?;瘜W(xué)工業(yè)區(qū)設(shè)有生產(chǎn)研發(fā)基地。目前,我司生化試劑產(chǎn)品已達60000多種,并呈不斷增長態(tài)勢。經(jīng)過不斷的創(chuàng)新與發(fā)展,上海弘順生物科技有限公司創(chuàng)立了公司自主試劑品牌(品牌:HonSun),為廣大科研工作者提供了高品質(zhì)的實驗試劑。我司生化試劑種類涵蓋氨基酸類、蛋白質(zhì)