DNA凝膠回收試劑盒

信裕生物的DNA凝膠回收試劑盒(DNA Gel Extraction Kit)，是一種用于從DNA瓊脂糖凝膠中回收目的DNA的試劑盒。
本試劑盒采用了融膠液，可以使瓊脂糖凝膠完全融化。同時(shí)采用了一種新型的離子交換柱，在特定條件下，使DNA能在離心過(guò)柱的瞬間，結(jié)合到DNA純化柱上，在一定條件下又能將DNA充分洗脫，從而實(shí)現(xiàn)DNA的快速純化。無(wú)需酚氯仿抽提，無(wú)需酒精沉淀，通常12個(gè)樣品只需不足20分鐘即可完成。
每個(gè)DNA純化柱可以結(jié)合的DNA量的上限約為15微克。
適用于從DNA瓊脂糖凝膠(agarose gel)電泳后割取的含有目的DNA的凝膠塊中快速提取DNA。該目的DNA通常為PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA酶切出來(lái)的DNA片段、超螺旋質(zhì)粒DNA單酶切后的線(xiàn)性化產(chǎn)物和DNA連接產(chǎn)物等。
本試劑盒適用于純化100bp-10kb DNA。長(zhǎng)至30個(gè)堿基的引物均可被完全去除。
DNA回收效率通常為60-90%。接近100bp或10kb的DNA片段回收效率要略低一些，大于10kb的DNA回收效率迅速下降。另外如果樣品中DNA含量特別低也會(huì)導(dǎo)致回收效率下降。
本試劑盒純化所得DNA可直接用于酶切，連接，轉(zhuǎn)化細(xì)菌，測(cè)序，PCR，雜交等后續(xù)操作。 
每個(gè)試劑盒足夠用于50個(gè)平均重量不超過(guò)400微克的凝膠樣品。
包裝清單：

保存條件：
室溫保存，一年有效。
注意事項(xiàng)：
次使用前在溶液II(洗滌液)中加入39ml無(wú)水乙醇，混勻，并在瓶上做好標(biāo)記。
溶液I對(duì)人體有刺激性，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意適當(dāng)防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本試劑盒所有操作均在室溫進(jìn)行，操作時(shí)無(wú)需冰浴。所有離心也均在室溫進(jìn)行。
廢液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丟棄。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。使用說(shuō)明：
1.切膠回收后，稱(chēng)重，將膠切碎或在離心管內(nèi)用1ml槍頭搗碎。
2.加入等體積的溶液I（如膠為100mg，則加100微升溶液I），vortex或顛倒混勻。
3.50-60℃水浴加熱約10分鐘至膠全融，期間，需vortex或顛倒混勻3-4次，以加速凝膠融解。
如果膠碎片較小，3-5分鐘即可全融，凝膠碎片較大則需較長(zhǎng)時(shí)間，膠全融后至少再在50-60℃水浴加熱2分鐘。50-60℃間任一溫度都適合于本試劑盒。如果DNA片段大于5kb，宜顛倒混勻。Vortex容易導(dǎo)致大片段DNA斷裂。
4.加入到DNA純化柱內(nèi)， 室溫放置1分鐘。
如果體積較大，DNA純化柱內(nèi)容納不下，可以把部分樣品加入到純化柱內(nèi)，經(jīng)離心處理后，再加入剩余的樣品繼續(xù)處理。
5.最高速(16000g，約12000-14000rmp左右)離心1分鐘，倒棄收集管內(nèi)的液體。
注意：這一步一定要達(dá)到16000g，較低離心速度會(huì)導(dǎo)致回收效率下降。
6.在DNA純化柱內(nèi)加入700微升溶液II，室溫放置1分鐘。
7.最高速離心1分鐘，洗去雜質(zhì)。倒棄收集管內(nèi)的液體。
8.再加入500微升溶液II，最高速離心1分鐘，進(jìn)一步洗去雜質(zhì)。倒棄收集管內(nèi)的液體。
9.最高速再離心1分鐘，除去殘留液體并讓殘留的乙醇充分揮發(fā)。
10.將DNA純化柱置于1.5毫升離心管上，加入30微升溶液III至管內(nèi)柱面上，放置1分鐘。
用1.5ml離心管作為收集管。溶液III需要直接加至管內(nèi)柱面中央，使液體被純化柱吸收。如果不慎將溶液III沾在管壁上，一定要震動(dòng)管子，使液體滑落到管底，以便被純化柱吸收。也可以用重蒸水或Milli-Q級(jí)純水替代溶液III，但是水的pH應(yīng)不小于6.5。如需得到較高濃度的DNA，可以只加20微升溶液III，但產(chǎn)量會(huì)略有下降。放置較長(zhǎng)時(shí)間例如3-5分鐘，會(huì)對(duì)提供產(chǎn)量略有幫助。
11.最高速離心1分鐘，所得液體即為高純度DNA。