pp53-TA-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)
pp53-TA-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)是信裕生物自行研發(fā)的用于檢測(cè)p53轉(zhuǎn)錄活性水平的報(bào)告基因質(zhì)粒。pp53-TA-luc是以信裕生物的pGL6-TA質(zhì)粒為模板，在其多克隆位點(diǎn)插入了多個(gè)p53結(jié)合位點(diǎn)，可以高靈敏度地檢測(cè)p53的激活水平。
pGL6-TA質(zhì)粒是用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行螢火蟲(chóng)螢光素酶(firefly luciferase)報(bào)告基因檢測(cè)的新一代質(zhì)粒。該報(bào)告基因質(zhì)粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改進(jìn)，一方面對(duì)于luciferase的編碼進(jìn)行了改進(jìn)，確保能更好地在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，同時(shí)對(duì)整個(gè)質(zhì)粒中所有可以被預(yù)測(cè)出的可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)全部進(jìn)行了適當(dāng)?shù)耐蛔兲幚?，在保持原有功能不變的情況下，使各種轉(zhuǎn)錄因子在質(zhì)粒上的非特異性結(jié)合降到最低。
螢光素、螢光素酶、螢火蟲(chóng)螢光素酶和海腎螢光素酶也經(jīng)常被稱(chēng)作熒光素、熒光素酶、螢火蟲(chóng)熒光素酶和海腎熒光素酶。
pp53-TA-luc質(zhì)粒的主要信息如下：
p53 response element
20-73
Minimal TA promoter (pTA)
96-118
luc2 reporter gene
160-1812
SV40 late poly(A) signal
1847-2068
SV40 early enhancer/promoter
2116-2534
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region
2559-3353
Synthetic poly(A) signal
3378-3426
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region
3493-3512
ColE1-derived plasmid replication origin
3750
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region
4541-5401
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site
5506-5659
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region
5608-5627
pp53-TA-luc質(zhì)粒的圖譜如下：
pp53-TA-luc的多克隆位點(diǎn)及p53 response element的詳細(xì)圖譜如下：
BglI KpnI p53 response element
1
GGCCTAACTG
CGTTTGCCTT
GCCTGGACTT
GCCTGGCCTT
CCGGATTGAC
GCAAACGGAA
CGGACCTGAA
CGGACCGGAA
51
GCCTTGGACA
TGCCCGGGCT
CAGAAGCTTA
CGGAACCTGT
ACGGGCCCGA
GTCTTCGAAT
101
GGTATATAAT
CTTCCAGCTT
GGCAATCCGG
TACTGTTGGT
CCATATATTA
GAAGGTCGAA
CCGTTAGGCC
ATGACAACCA
pp53-TA-luc中沒(méi)有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pp53-TA-luc)包括：
Aat II
Afl II
Asc I
Ase I
Bsa I
BsaA I
BsiW I
BspM II
BssH II
Eco72 I
EcoR I
EcoR V
Mlu I
Nde I
Nhe I
Nru I
PaeR7 I
PflM I
Pme I
Pml I
Psp1406 I
Rsr II
Sac I
SnaB I
Spl I
Tth111 I
Vsp I
Xcm I
Xho I
Xmn I
pp53-TA-luc中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pp53-TA-luc once)包括：
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
9
EcoN I
CCTNN`N,NNAGG
3034
Bgl I
GCCN,NNN`NGGC
9
BsiC I
TT`CG,AA
3429
Acc65 I
G`GTAC,C
15
BstB I
TT`CG,AA
3429
Asp718
G`GTAC,C
15
Sal I
G`TCGA,C
3443
Kpn I
G,GTAC`C
19
Afl III
A`CRYG,T
3693
PspA I
C`CCGG,G
64
ApaL I
G`TGCA,C
4007
Xma I
C`CCGG,G
64
HgiE II
ACCNNNNNNGGT -1/13
4272
Srf I
GCCC|GGGC
66
Not I
GC`GGCC,GC
4513
Sma I
CCC|GGG
66
BstX I
CCAN,NNNN`NTGG
4537
Bgl II
A`GATC,T
75
BstE II
G`GTNAC,C
4540
Hind III
A`AGCT,T
85
Ahd I
GACNN,N`NNGTC
4615
BsrG I
T`GTAC,A
651
Bsu36 I
CC`TNA,GG
4971
Dra III
CAC,NNN`GTG
1307
Pvu I
CG,AT`CG
4985
Gsu I
CTGGAG 21/19
1540
Sac II
CC,GC`GG
5009
Bpm I
CTGGAG 22/20
1541
Bst1107 I
GTA|TAC
5125
Apo I
R`AATT,Y
1923
Xca I
GTA|TAC
5125
Mun I
C`AATT,G
1987
Spe I
A`CTAG,T
5444
BamH I
G`GATC,C
2080
BsmA I
GTCTC`/9
5456
Stu I
AGG|CCT
2513
BsmB I
CGTCTC 7/11
5457
pp53-TA-luc質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下：
RVprimer3 (5608-5627):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pp53-TA-luc的全序列信息： D2223 pp53-TA-luc-seq.txt
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱(chēng)
包裝
KL-2223-1μg
pp53-TA-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)
1μg
KL-2223-100μg
pp53-TA-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)
100μg
保存條件：
-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
本質(zhì)粒未經(jīng)信裕生物書(shū)面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說(shuō)明：
1. 首次使用1μg包裝的本產(chǎn)品時(shí)，請(qǐng)先取少量本質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，進(jìn)行質(zhì)粒小量、中量或大量抽提后再用于后續(xù)用途。抽提獲得的質(zhì)粒可以通過(guò)酶切電泳進(jìn)行鑒定，或通過(guò)測(cè)序進(jìn)行鑒定。
2. 100μg包裝的本產(chǎn)品質(zhì)粒濃度為0.1μg/μl，共1ml?？梢灾苯佑糜诿盖谢蛘咿D(zhuǎn)染細(xì)胞。
3. pp53-TA-luc可以用常規(guī)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染細(xì)胞。檢測(cè)時(shí)可采用信裕生物的螢火蟲(chóng)螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(RG005/RG006)或雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(RG027/RG028)。
4. 紫外照射、離子輻射等可以導(dǎo)致DNA損傷的作用或試劑可以激活p53，可以用作pp53-TA-luc報(bào)告基因檢測(cè)時(shí)的陽(yáng)性對(duì)照。
關(guān)鍵字： pp53-TA-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)說(shuō)明書(shū)；pp53-TA-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)廠家
上?？道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專(zhuān)營(yíng)生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品?？偛课挥谏虾?，并在北京、廣東，江西，吉林等全國(guó)30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國(guó)科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學(xué)院，上海中醫(yī)藥大學(xué)，華東師范大學(xué)，第二軍醫(yī)大學(xué)，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。