PCR 擴(kuò)增試劑盒
貨號(hào)：RE0225
規(guī)格：50T/100T
保存：-20℃
試劑盒組成：
產(chǎn)品說(shuō)明：
Taq DNA Polymerase 是從克隆有 Thermus aquaticus DNA Polymerase 基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表達(dá)后分離純化的，其分子量為 94 KD。該酶具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和 5’-3’核酸外切酶活性，無(wú) 3’-5’外切酶活性。在 PCR 反應(yīng)中，Taq DNA Polymerase 延伸速度為 1-2 kb/分鐘，產(chǎn)物 3’端帶A，可直接用于 T/A 載體克隆。該酶無(wú)外源核酸酶和細(xì)菌基因組 DNA 的污染，穩(wěn)定性好，特異性強(qiáng)。
使用本試劑盒快速簡(jiǎn)便，可用于PCR相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室工作。
影響PCR反應(yīng)的因素很多，即使使用經(jīng)高度優(yōu)化的PCR Master 也會(huì)遇到問(wèn)題。如果發(fā)現(xiàn)PCR反應(yīng)沒(méi)有得所需產(chǎn)物或條帶較弱，建議用25mmol/L MgCl2 調(diào)節(jié)反應(yīng)體系中的Mg2+濃度，以期獲得更好的結(jié)果。
使用方法：
1. 模板DNA準(zhǔn)備：基因組DNA，反應(yīng)體系中模板濃度推薦范圍1-10 μg/ml；質(zhì)?；蚴删wDNA濃度0.1-1ng/ml。
2. 在無(wú)菌潔凈的PCR管中，參考下面體系配制反應(yīng)溶液。
3. 輕輕混勻后短暫離心。
注：在同時(shí)進(jìn)行幾個(gè)平行反應(yīng)時(shí)，在一個(gè)離心管中將單組分混合均勻，分裝到 PCR 管中，再依次加入 MgCl2和模板 DNA。
4. 加適量的礦物油后，置于 PCR 儀中進(jìn)行 PCR 反應(yīng)。
注：對(duì)于有熱蓋的 PCR 儀可不加礦物油。
5. PCR反應(yīng)循環(huán)設(shè)置
94℃ 3min
94℃ 30sec
55℃ 30sec 30 cycles
72℃ 500-2000bp/1min
72℃ 5min
6. 結(jié)果檢測(cè)：反應(yīng)結(jié)束后，取5μl反應(yīng)產(chǎn)物，瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng)：
1. PCR 能夠從很少量的分子開(kāi)始獲得超過(guò) 1 千萬(wàn)拷貝數(shù)的目標(biāo) DNA 序列。其敏感性要求模板不能被實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中其他 DNA 或以前的擴(kuò)增產(chǎn)物所污染。
2. DNA 模板的準(zhǔn)備，反應(yīng)混合物的調(diào)配，PCR 反應(yīng)過(guò)程以及隨后的產(chǎn)物分析都應(yīng)在不同的地方分開(kāi)操作。
3. 建議使用帶有紫外燈的超凈臺(tái)來(lái)混合反應(yīng)混合物。每一步PCR 操作都應(yīng)該使用新的手套。
4. 要求 PCR 反應(yīng)所需試劑分開(kāi)配制。
5. 溶液應(yīng)分裝成小計(jì)量單位并保存在指定存放 PCR 試劑的地方。試劑應(yīng)該與其他 DNA 模板分開(kāi)存放。
6. 為了確定無(wú)污染，應(yīng)該同時(shí)做一個(gè)不含 DNA 模板的標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)。
7. 50 µl 體系不同濃度 Mg2+所需 MgCl2 溶液體積：
8. 本產(chǎn)品僅供科研使用。
Taq DNA Polymerase（含10x PCR buffer，預(yù)混氯化鎂）
Taq Plus DNA Polymerase（含10x PCR buffer，預(yù)混氯化鎂）
Pfu DNA Polymerase（含10x PCR buffer，預(yù)混氯化鎂）
Super-High-Fidelity DNA Polymerase 高保真快速DNA聚合酶
2×Taq PCR MasterMix (含染料）
2×Taq PCR MasterMix (不含染料）
2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料）
2×Taq Plus PCR MasterMix (不含染料）
2×Pfu PCR MasterMix (含染料）
2×Pfu PCR MasterMix (不含染料）
通用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(M-mLV，不含Taq酶) cDNA 合成試劑盒
SYBR Green I(PCR級(jí)，10000X)
SYBR Green I(PCR級(jí)，20X)
Hot Start Taq DNA Polymerase 熱啟動(dòng)Tap DNA 聚合酶
新型2×SYBR Green PCR Mastermix
2×SYBR Green PCR Mastermix
TaqMan One Step RT-qPCR Kit
關(guān)鍵字： PCR；聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；Taq 酶
金克隆生物公司位于北京經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)，主要從事生物醫(yī)藥試劑的研發(fā)和生產(chǎn)，并兼營(yíng)部分生化試劑和儀器耗材，主營(yíng)方向有細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、蛋白與免疫、組織學(xué)、微生物培養(yǎng)等相關(guān)試劑與耗材。庫(kù)存現(xiàn)貨10000多種，其中我公司自主開(kāi)發(fā)的分子生物學(xué)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)及檢測(cè)試劑、分子免疫學(xué)產(chǎn)品等在質(zhì)量和價(jià)格方面具有較大的市場(chǎng)優(yōu)勢(shì)，歡迎廣大經(jīng)銷商洽談合作。