??????CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒(CFDA SE Cell Proliferation Assay and Tracking Kit)是碧云天研發(fā)的基于一種新型熒光探針CFDA SE的用于細(xì)胞增殖檢測和細(xì)胞熒光示蹤的檢測試劑盒。CFDA SE目前被廣泛用于替代MTT法或[³H]-thymidine摻入等其它細(xì)胞增殖檢測方法。
??????基于CFDA SE熒光標(biāo)記的細(xì)胞增殖檢測和[³H]-thymidine摻入、BrdU標(biāo)記獲得的檢測結(jié)果完全一致，但同時可以提供更多的細(xì)胞增殖信息。使用CFDA SE檢測可以提供整個細(xì)胞群中有多少比例的細(xì)胞分裂了1次、2次或更多次數(shù)，同時如果和其它熒光探針聯(lián)用，可以獲取不同分裂次數(shù)細(xì)胞的其它相關(guān)信息。
??????CFDA-SE的全稱為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，分子式為C₂₉H₁₉NO₁₁，分子量為557.47，CAS?
number為150347-59-4。CFDA?SE可以通透細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，CFSE可以偶發(fā)性地(spontaneously)并不可逆地和細(xì)胞內(nèi)蛋白的Lysine殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，并標(biāo)記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA?SE后大約24小時，即可充分標(biāo)記細(xì)胞。被CFDA?SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標(biāo)記的時間可達(dá)數(shù)個月。CFDA?SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，比以前使用的其它細(xì)胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均勻。
??????由于CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定，每分裂一次子代細(xì)胞的熒光會減弱一半，這樣通過流式細(xì)胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細(xì)胞，分裂一次的細(xì)胞(1/2的熒光強(qiáng)度)，分離兩次的細(xì)胞(1/4的熒光強(qiáng)度)，分裂三次的細(xì)胞(1/8的熒光強(qiáng)度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細(xì)胞。采用CFDA SE通過流式細(xì)胞儀檢測獲得的檢測結(jié)果參考右圖。每一個峰代表一種分裂次數(shù)的細(xì)胞，從右至左的峰通常依次為分裂0次、1次、2次、3次等次數(shù)的細(xì)胞。分裂次數(shù)較多后，分裂0次或1次等沒有分裂或分裂次數(shù)較少的細(xì)胞會逐漸減少直至檢測不到。
??????使用CFDA SE可以檢測分裂多達(dá)8次或更多次數(shù)的細(xì)胞增殖。
??????目前CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測。最常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測，也可以用于成纖維細(xì)胞、NK細(xì)胞等其它細(xì)胞的增殖檢測，甚至還可以用于細(xì)菌增殖的檢測。
??????CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為518nm，使用流式細(xì)胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞也可以用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。
??????CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞無論在體外還是體內(nèi)都不會使鄰近細(xì)胞染色。即CFDA SE熒光探針完成標(biāo)記后不會從一個細(xì)胞轉(zhuǎn)移到鄰近細(xì)胞。
??????CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞僅需5-15分鐘即可完成。對于不同細(xì)胞，標(biāo)記時間需自行摸索。
??????本試劑盒提供了配制CFDA SE所需的溶液以及CFDA SE進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記時所需的配套試劑。
??????如果每個檢測樣品的熒光探針標(biāo)記體積為1ml，本試劑盒共可以檢測2000個樣品。

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包裝清單：

保存條件：
??????-20℃保存，半年有效。其中CFDA SE需避光保存。
注意事項(xiàng)：
??????CFDA SE配制成儲存液后宜在一個月內(nèi)使用完畢，最長不宜超過2個月。CFDA SE易被水解，在水溶液中會很快變質(zhì)。請在使用過程中避免接觸水。在標(biāo)記細(xì)胞的過程中和水接觸是在許可的范圍內(nèi)的。
??????CFDA SE溶劑在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
??????熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。?