??????碧云天的Rat IL-6 ELISA Kit (Rat Interleukin-6 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即大鼠白細胞介素6酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測大鼠血清、血漿、細胞或組織裂解液、或細胞培養(yǎng)上清液中的IL-6的ELISA試劑盒。
??????本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明，最小檢出量為67pg/ml，與GDNF、GM-CSF、IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-10、PDGF-BB、TNF-α、人IL-6、小鼠IL-6均沒有交叉反應(yīng)，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
??????IL-6即白細胞介素-6(簡稱白介6)，是一種多功能、呈α螺旋、易于磷酸化和糖基化的細胞因子，分子量為22-28KD。IL-6在免疫反應(yīng)、炎癥、血細胞生成、骨代謝、細胞增殖、生長、存活和分化、以及腫瘤等疾病的發(fā)生發(fā)展過程中有重要作用。
??????IL-6的受體是細胞表面的IL-6Rα和gp130亞基組成的異二聚體。IL-6與IL-6Rα結(jié)合后引發(fā)IL-6Rα與gp130的二聚化，從而激活下游的信號通路，主要包括JAK/STAT信號通路、Ras信號通路以及PI3K信號通路。IL-6Rα和gp130組成了IL-6的受體復(fù)合物，而gp130也是CLC、CNTF、CT-1、IL-11、IL-27、LIF、OSM等的受體復(fù)合物的組分。IL-6的信號通路圖見圖1。

圖1. IL-6的信號通路示意圖。

??????本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中靶蛋白的的濃度，其原理見圖2。靶蛋白特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標板上，當加入標準品或樣品時，其中的靶蛋白會與捕獲抗體結(jié)合。當加入生物素化的抗靶蛋白抗體后，生物素化抗靶蛋白抗體與靶蛋白結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標記Streptavidin(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。靶蛋白濃度與A450值呈正比，通過繪制標準曲線，對照樣品吸光度值，即可計算出樣品中靶蛋白濃度。

圖2. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

??????一個包裝的本試劑盒，包括標準品檢測，可以進行96次檢測。
包裝清單：

保存條件：
??????除標準品外，4℃保存6個月內(nèi)有效。標準品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個月內(nèi)有效。注意TMB溶液避光保存。
注意事項：
??????由于標準品一般是凍干粉，在制備后需要嚴格校準，所以標準品的瓶數(shù)及每瓶標準品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標準品標簽上的標注為準。
??????洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
??????為保證標準品的精確性，標準品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
??????TMB對人體有刺激性，請注意適當防護。
??????如果發(fā)現(xiàn)TMB辣根過氧化物酶顯色液出現(xiàn)混濁或顏色變成藍色，應(yīng)該停止使用。
??????加樣時，請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
??????不宜混用不同批號的試劑盒組份，每批次試劑盒均經(jīng)過獨立測試。
??????充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
??????本試劑盒很多操作在室溫進行，要求嚴格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
??????洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
??????檢測標準品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。
??????加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。