"SW620細(xì)胞：人結(jié)腸癌細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SW620 Cell

細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣

71125-38-7

很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近300種細(xì)胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細(xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。

SW620細(xì)胞：人結(jié)腸癌細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁生長

AsPC-1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：3-1：6傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣；細(xì)胞生長特性：貼壁生長；細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞來源于人胰腺癌裸鼠異種移植產(chǎn)生的癌性腹水，可以表達(dá)CEA，人胰腺相關(guān)抗原、人胰腺特異性抗原和黏蛋白。

BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

P30/OHK細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：10^5 cells/60mm dish；細(xì)胞形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞；細(xì)胞生長特性：懸浮生長；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

HMVEC細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：微血管；內(nèi)皮細(xì)胞

L6細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：成肌細(xì)胞樣；細(xì)胞生長特性：貼壁生長；細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞是Yaffe在甲基膽蒽存在的情況下從大鼠大腿肌原代培養(yǎng)的最初兩代細(xì)胞中分離得到的；在培養(yǎng)基中融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維，細(xì)胞融合的程度隨著代數(shù)的增加而下降，因此細(xì)胞應(yīng)低代次冷凍并周期性地重新克隆以選擇融合能力強(qiáng)的細(xì)胞。鼠痘病毒陰性。該細(xì)胞應(yīng)在達(dá)匯合狀態(tài)前傳代，以延緩細(xì)胞分化能力的喪失。

【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會與細(xì)胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢所以不會影響到細(xì)胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時就會影響到細(xì)胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞)，37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細(xì)胞某項指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。1)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；3)超凈臺的風(fēng)機(jī)不能過大，風(fēng)機(jī)到6-8格。否則也可能能致霉菌污染；4)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進(jìn)入操作。

B16細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：3傳代，2-3天換液一次；細(xì)胞形態(tài)特性：梭形；細(xì)胞生長特性：貼壁生長；細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源于C57BL/6J小鼠黑色素瘤，可以產(chǎn)生黑色素，同基因小鼠體內(nèi)移植可成瘤

SupT1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞；細(xì)胞生長特性：懸浮生長；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

TG-905細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

Hep-3B[Hep3B]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

MZ-CRC-1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：甲狀腺髓樣癌；女性

KYSE-14細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁生長??；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

SW620細(xì)胞：人結(jié)腸癌細(xì)胞

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕?xì)胞】1)選對數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染)，在凍存前1d換液；2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)5×10／ml左右密度，離心，去上清；3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外；4)分裝于無菌凍存管中，每管加1.5m懸液；5)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；6)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-1℃／min的速度，在30～40min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細(xì)胞】1)從罐中取出凍存管；2)迅速放入36℃～37℃水浴，不時搖動，使其急速融化，30～60s內(nèi)完成；3)凍存管用70％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加10ml培養(yǎng)液；4)低速離心(500～1000r／min) 5min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到10／ml，在融后稀釋20倍時，仍能保持5×10／ml數(shù)量。

細(xì)胞背景資料：SW620是從一個51歲男性白人組織中分離得到。由A.Leibovitz等從一個淋巴結(jié)建株。細(xì)胞系主要由無絨毛的小園球細(xì)胞和雙極細(xì)胞組成。它僅合成少量癌胚抗原（CEA）且在裸鼠中有高度的致瘤性

SW620細(xì)胞：人結(jié)腸癌細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：1：3傳代，2-3天換液一次

細(xì)胞培養(yǎng)溫度：維持培養(yǎng)細(xì)胞旺盛生長，必須有恒定而適宜的溫度。不同種類的細(xì)胞對培養(yǎng)溫度要求也不同。人體細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)溫度為36.5℃±0.5℃，偏離這一溫度范圍，細(xì)胞的正常代謝會受到影響，甚至死亡。培養(yǎng)細(xì)胞對低溫的耐受力較對高溫強(qiáng)，溫度上升不超過39℃時，細(xì)胞代謝與溫度成正比；人體細(xì)胞在39-40℃1小時，即能受到一定損傷，但仍有可能恢復(fù)；在40-41℃1小時，細(xì)胞會普遍受到損傷，僅小半數(shù)有可能恢復(fù)；41-42℃1小時，細(xì)胞受到嚴(yán)重?fù)p傷，大部分細(xì)胞死亡，個別細(xì)胞仍有恢復(fù)可能；當(dāng)溫度在43℃以上1小時，細(xì)胞全部死亡。相反，溫度不低于0℃時，對細(xì)胞代謝雖有影響，但并無傷害作用；把細(xì)胞放入25－35℃時，細(xì)胞仍能生存和生長，但速度減慢；放在4℃數(shù)小時后，再回到37℃培養(yǎng)，細(xì)胞仍能繼續(xù)生長。細(xì)胞代謝隨溫度降低而減慢。當(dāng)溫度降至冰點以下時，細(xì)胞可因胞質(zhì)結(jié)冰受損而死亡。但是，如果向培養(yǎng)液中加入一定量的冷凍保護(hù)劑(二甲亞砜或甘油)，可在深低溫下如－80℃或－196℃(液氮)長期保存。

NAMALWA細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代。3天內(nèi)可長滿；細(xì)胞形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞樣；細(xì)胞生長特性：懸浮生長 ；細(xì)胞背景資料：這株細(xì)胞有EB病毒基因組。

EC109細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：食管鱗癌；女性

H1437細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

NCI-H1963[H1963]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

BT474細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；2-3天換液1次；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣；圓形、成團(tuán)；細(xì)胞生長特性：貼壁生長；細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞系由LasfarguesE和CoutinhoWG建立，源于一名60歲患有浸潤性乳腺導(dǎo)管癌的白人女性的實體瘤。

BT-B細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

HEI193細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：神經(jīng)鞘瘤；男性

SW620細(xì)胞：人結(jié)腸癌細(xì)胞

HFT-8810[HFT8810]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

HCC-9204細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

SO-RB50細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：懸??；細(xì)胞背景資料：視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤；女性

HCC-9204細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

CESS細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：懸?。患?xì)胞背景資料：急性髓系白血?。荒行?/div>