??????碧云天的細(xì)胞凋亡－DNA Ladder抽提試劑盒(離心柱式)(Apoptosis, DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column)是目前最先進(jìn)的DNA Ladder抽提試劑盒之一。本試劑盒是針對細(xì)胞凋亡過程中產(chǎn)生的核小體間DNA鏈斷裂而設(shè)計的?？梢苑浅Ｓ行У爻樘嶙钚∑螢?80-200bp的DNA ladder，同時又可以抽提到50kb左右的基因組DNA。
??????DNA ladder也稱DNA fragmentation，是細(xì)胞凋亡的一個重要指標(biāo)。通常觀察到DNA ladder，就可以判定細(xì)胞發(fā)生了凋亡。
??????樣品首先被蛋白酶K消化，隨后加入適合DNA結(jié)合到純化柱上的緩沖液，然后加入到純化柱內(nèi)。通過高速離心，使DNA在穿過純化柱的瞬間，結(jié)合到純化柱上，隨后通過兩次洗滌去除各種雜質(zhì)，最后通過洗脫液把DNA洗脫下來。整個過程無需酚氯仿抽提，無需酒精沉淀，樣品裂解后僅需約15分鐘即可完成。
??????通過DNA純化柱方式抽提DNA ladder比用傳統(tǒng)的酚氯仿抽提酒精沉淀方法更加便捷，小片段DNA不容易損失。
??????本試劑盒每次最多可以抽提20mg組織或200-350萬個培養(yǎng)細(xì)胞。樣品用量過多，反而會影響抽提效果。
??????試劑盒提供了RNase A，可以獲得不含RNA的高純度總DNA，排除了RNA對DNA ladder觀察造成的干擾。
??????純化柱對于DNA的容量約為30微克。通常每200萬Hela細(xì)胞或500萬淋巴細(xì)胞可以抽提得到15-25微克總DNA，每 25
mg 肝、腦、腎組織可以抽提得到10-30微克總DNA，每25毫克心、肺組織可以抽提得到5-10微克總DNA，每10mg脾組織可以抽提得到5-30微克總DNA。樣品的用量請勿超過純化柱的容量，樣品用量能保持在純化柱容量的70%或以下。當(dāng)然過少的樣品也不利于檢測到DNA ladder。
??????對于培養(yǎng)細(xì)胞的凋亡檢測，通常6孔板一個孔的細(xì)胞就足夠用于DNA ladder的抽提和檢測。
??????本試劑盒可以抽提50個樣品。
包裝清單：

保存條件：
??????蛋白酶K-20℃保存，其余均室溫保存。一年有效。蛋白酶K室溫(15-25℃)存放一周，活力無明顯下降。
注意事項：
??????溫度較低時樣品裂解液A或樣品裂解液B中可能會有沉淀產(chǎn)生，屬正?，F(xiàn)象。使用前必須檢查一遍。如有沉淀，55℃水浴孵育使沉淀溶解，混勻后使用。
?????? 次使用前洗滌液I需添加7ml無水乙醇，洗滌液II需添加24ml無水乙醇，混勻，并在瓶上做好標(biāo)記。
??????本試劑盒需使用55℃或70℃水浴，請?zhí)崆白骱脺?zhǔn)備。
??????除特別說明外，每次Vortex應(yīng)控制在5-10秒左右。
??????本試劑盒所有操作均在室溫進(jìn)行，操作時無需冰浴。所有離心也均在室溫進(jìn)行。
??????廢液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丟棄。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。