概述
細(xì)菌肝素酶 I 克隆自埃氏擬桿菌（Bacteroides eggerthii），在 E. coli 中表達(dá)，也叫肝素裂解酶 I，作用于肝素和高度硫酸化的硫酸乙酰肝素域。反應(yīng)產(chǎn)生的寡糖產(chǎn)物包含不飽和糖醛酸，可以在 232 nm 處用紫外吸收光譜檢測(cè)。
單位定義 1 單位指 100 μl 反應(yīng)體系中，30℃ pH 7.0條件下，每分鐘從豬粘膜肝素中釋放 1.0 μmol 不飽和寡糖所需的酶量。
分子量 42,000 daltons。
儲(chǔ)存溫度 -70℃下
熱滅活 100℃ 1分鐘
備注
1.避免反復(fù)凍融循環(huán)。
2.反應(yīng)條件： a.將10μl1mg / ml肝素底物，10μl細(xì)菌肝素酶反應(yīng)緩沖液和H 2 O的總反應(yīng)體積為100μl。 b.加入1μl細(xì)菌肝素酶I. c.在30℃下孵育反應(yīng)1-24小時(shí)（監(jiān)測(cè)232nm處的吸光度以確定部分或完全消化）。 必須根據(jù)特定底物確定孵育時(shí)間和酶濃度。
參考文獻(xiàn)1. Landry, D. et al New England Biolabs, Inc.,unpublished results.
2. Yamada, S., Murakami, T., Tsuda, H., YoshidaK., Sugahara, K. (1995) J. Biol. Chem. 270,
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Merchant, Z.M., Kim, Y.S., Rice, K.G., Linhardt, R.(1985) J. Biol. Chem. 229, 369-377.
關(guān)鍵字： 肝素 肝素酶 肝素酶I
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