"STO Cells小鼠胚成纖維細胞低代次保種|STR圖譜
【培養(yǎng)觀察】
定期觀察STO Cells小鼠胚成纖維細胞低代次保種|STR圖譜生長狀態(tài),注意培養(yǎng)基的pH值變化和細胞密度,及時換液和傳代。
【細胞復(fù)蘇】
復(fù)蘇細胞時,應(yīng)快速將凍存管從液氮中取出并置于37℃水浴中解凍,然后轉(zhuǎn)移到含新鮮培養(yǎng)基的無菌管中并吹打混勻。整個復(fù)蘇過程應(yīng)盡可能在5-10分鐘內(nèi)完成,以確保細胞的高存活率。
【細胞傳代】
傳代時,應(yīng)使用適量的胰蛋白酶溶液進行消化,并在顯微鏡下觀察細胞消化情況。消化下來的細胞容易成團,需要吹打吹散。傳代后,應(yīng)確保細胞均勻分布在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
【細胞凍存】
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。一般使用凍存液進行凍存,并置于液氮中儲存。
【STO Cells小鼠胚成纖維細胞低代次保種|STR圖譜英文別名】
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【細胞培養(yǎng)經(jīng)驗分享】啟蒙老師的重要性:一般進實驗室都有師兄師姐帶著做,他們就是你做細胞的啟蒙老師。他們的操作手法、細節(jié)、理論講解就成了你操作的準(zhǔn)則,如營養(yǎng)液、細胞瓶的擺放位置、滅菌處理程序、開蓋手法、細胞吹打手法等等。要學(xué)會他們的正確操作,在第一次的時候就要重視。像養(yǎng)孩子一樣養(yǎng)細胞,細胞有時真的很脆弱,最好每天都去看看它,以防止出現(xiàn)培養(yǎng)箱缺水、缺二氧化碳、停電、溫度不夠等異?,F(xiàn)象,也好及時解決這些意外,避免重復(fù)實驗帶來的更大痛苦。好細胞要及時保種:細胞要分批傳代,這樣即使有一批出了問題,還有一批備用的。像后者一般人可能不容易做到。
血清作為細胞培養(yǎng)基的重要成分,為細胞生長提供了必需的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子。當(dāng)細胞增殖速率異常時,可考慮逐步提高血清濃度至15-20%。這一范圍的血清濃度能夠為細胞提供更豐富的營養(yǎng)支持,促進其增殖。然而,這一過程必須謹慎進行。建議將血清濃度的提升分為2-3個階段,每個階段維持3-5天,讓細胞有足夠的時間適應(yīng)新的環(huán)境。例如,可以從常規(guī)的10%血清濃度開始,先提升至12-15%,觀察細胞狀態(tài)后再決定是否繼續(xù)提高至15-20%。
【背景信息】
STO Cells小鼠胚成纖維細胞低代次保種|STR圖譜STO是一株繼代生長的胚成纖維細胞系,可用于制備飼養(yǎng)層細胞(feederlayers)和其他研究。
【傳代比例】
1:2-1:4(STO Cells小鼠胚成纖維細胞低代次保種|STR圖譜首次傳代建議1:2)
【來源說明】
STO Cells小鼠胚成纖維細胞低代次保種|STR圖譜主要來源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等細胞庫
【生長特性】
STO Cells小鼠胚成纖維細胞低代次保種|STR圖譜貼壁生長
【形態(tài)特性】
STO Cells小鼠胚成纖維細胞低代次保種|STR圖譜上皮細胞樣
【換液周期】
STO Cells小鼠胚成纖維細胞低代次保種|STR圖譜每周2-3次
【產(chǎn)品包裝】
復(fù)蘇發(fā)貨:STO Cells小鼠胚成纖維細胞低代次保種|STR圖譜T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存發(fā)貨:1ml凍存管(兩支)
細胞消化注意事項(二):細胞狀態(tài):在消化前,應(yīng)確保細胞處于適宜的狀態(tài),如生長密度、形態(tài)和活力等。后續(xù)操作:消化后的細胞應(yīng)立即進行后續(xù)操作,如傳代、分離或計數(shù)等,以避免細胞在體外過長時間暴露而導(dǎo)致?lián)p傷或死亡。細胞消化是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟,需要嚴格遵循操作規(guī)程和注意事項,以確保細胞的良好分離和后續(xù)實驗的順利進行。
上皮細胞(epithelial cell)是構(gòu)成上皮組織的基本單位,廣泛分布在人體的各個表面和體腔內(nèi),外胚層來源:皮膚、腺垂體、內(nèi)耳膜、角膜、晶狀體、鼻腔、口腔、肛門等處的上皮細胞由外胚層發(fā)育而來。中胚層來源:間皮、內(nèi)皮等上皮細胞由中胚層發(fā)育而來。內(nèi)胚層來源:中耳、呼吸道、肺、胸腺、消化道、消化腺、膀胱、陰道、甲狀腺、甲狀旁腺等處的上皮細胞由內(nèi)胚層發(fā)育而來。許多癌癥起源于上皮細胞,如肝細胞癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌、肺癌、胃癌、前列腺癌、卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌。這些癌癥中的上皮細胞通常表現(xiàn)出細胞標(biāo)志物的變化,如E-cadherin的缺失和N-cadherin、vimentin等間充質(zhì)細胞標(biāo)志物的表達上調(diào)。
【物種來源】
STO Cells小鼠胚成纖維細胞低代次保種|STR圖譜來源于人源、鼠源等其它物種來源
【培養(yǎng)條件】
37°C、5%CO?、飽和濕度環(huán)境,使用含10%-20%FBS的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
【消化傳代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶促進細胞脫落。(懸浮細胞可省略這步操作)
【污染防控】
嚴格無菌操作,定期檢測支原體污染,必要時使用雙抗預(yù)防細菌污染。
【細胞狀態(tài)】
傳代和消化過程中,應(yīng)密切關(guān)注細胞狀態(tài),避免過度消化或機械損傷導(dǎo)致細胞活性下降。
【污染檢測】
支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性。
【細胞接收流程】
收到細胞后,應(yīng)首先觀察細胞狀態(tài),然后進行75%酒精消毒處理。將細胞置于37℃培養(yǎng)箱中放置2-4小時以穩(wěn)定STO Cells小鼠胚成纖維細胞低代次保種|STR圖譜狀態(tài)。當(dāng)細胞密度達到80%-90%時,即可進行首次傳代培養(yǎng)。
【操作規(guī)范】
在細胞培養(yǎng)和處理過程中,需嚴格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,以避免細胞污染和交叉污染。
【消化條件】
室溫下用胰酶消化1-3分鐘。
【生物安全等級】
1級。
【空泡現(xiàn)象】
在密集培養(yǎng)時,細胞中可見巨大的空泡,這是細胞的正常特性,無需擔(dān)心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清濃度有助于優(yōu)化STO Cells小鼠胚成纖維細胞低代次保種|STR圖譜實驗條件,提高實驗的重復(fù)性和穩(wěn)定性。這一濃度范圍經(jīng)過多年實驗和實踐的驗證,被認為是較為適宜的選擇。
細胞傳代準(zhǔn)備工作:預(yù)熱培養(yǎng)基和PBS:在開始傳代前,將完全培養(yǎng)基和磷酸鹽緩沖液(PBS),預(yù)熱至37℃,以確保細胞在操作過程中不會受到溫度沖擊。準(zhǔn)備無菌器材:包括無菌吸管、移液槍、離心管、培養(yǎng)皿、胰蛋白酶(或EDTA)溶液、完全培養(yǎng)基等。檢查細胞狀態(tài):在顯微鏡下觀察細胞的生長密度和形態(tài),確保細胞處于對數(shù)生長期且狀態(tài)良好。
一般來說,在開始細胞消化時,可以先根據(jù)經(jīng)驗設(shè)定一個大致的消化時間,然后在這個時間點前后密切觀察細胞的狀態(tài)。如果消化時間過長,可能會導(dǎo)致細胞受損,影響細胞的活性和功能;而消化時間過短,則可能導(dǎo)致細胞沒有完全分離,影響傳代效果。還可以通過觀察消化液的渾濁程度來判斷。在消化開始時,消化液通常是比較澄清的。隨著消化的進行,當(dāng)細胞逐漸脫落進入消化液中,消化液會變得渾濁。當(dāng)渾濁度達到一定程度,且細胞形態(tài)也符合消化完成的特征時,可以認為消化好了。總之,在細胞傳代用胰酶消化時,需要綜合考慮細胞形態(tài)變化、拍打或晃動的反應(yīng)、消化時間以及消化液的渾濁程度等多個因素,來準(zhǔn)確判斷消化是否完成。
MRCV Cells;背景說明:MRC-5細胞系來自14周齡男性胎兒的正常肺組織,該細胞老化前能傳代42~46個倍增時間。;傳代方法:1:2-1:5傳代;每周1-2次。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:成纖維細胞樣;相關(guān)產(chǎn)品有:NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞
OAW 42 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞
P31FUJ Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:5傳代;生長特性:懸浮生長;形態(tài)特性:淋巴母細胞;相關(guān)產(chǎn)品有:DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞
NTERA-2/D1 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞
32Dcl3 Cells;背景說明:骨髓淋巴瘤;C3H/HeJ;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:懸浮;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞
GM50089 Cells(提供STR鑒定圖譜)
HAP1 PHLPP2 (-) 2 Cells(提供STR鑒定圖譜)
HCEpiC Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
RERF-LC-MS Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:每周換液2次。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮細胞樣;相關(guān)產(chǎn)品有:NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞
H2023 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:每周換液2次;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
EAhy 926 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮細胞樣;相關(guān)產(chǎn)品有:SU86_86細胞、SK-MES-1細胞、huH 1細胞
HPDE Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長 ;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞
Vx2 Cells;背景說明:表皮鱗癌;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:697細胞、NCIH2196細胞、Psi-2 DAP細胞
NCI-H1437 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2-1:6傳代,每周換液2次。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
C-4-I Cells;背景說明:宮頸鱗癌;女性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞
HSE/LULS51 Cells(提供STR鑒定圖譜)
KOLF2.1J VCP R159H SNV/SNV Cells(提供STR鑒定圖譜)
MoOV-03 Cells(提供STR鑒定圖譜)
NYSCF-10005-417-417-Skin-mR-iPSC Cells(提供STR鑒定圖譜)
RG-422 Cells(提供STR鑒定圖譜)
Ubigene HEK293 TRADD KO Cells(提供STR鑒定圖譜)
WM4235 Cells(提供STR鑒定圖譜)
HG02233 Cells(提供STR鑒定圖譜)
Mink Lung Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞
Normal Rat, August 3, 1983 Cells;背景說明:NR8383(正常大鼠,1983年8月3日)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。細胞在gerbil肺細胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了大約8-9個月。隨后,不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細胞克隆并亞克隆NR8383細胞,并三次用軟瓊脂亞克隆。細胞表現(xiàn)出巨噬細胞的特性,吞噬酵母多糖和銅綠,非特異性脂酶活性,F(xiàn)c受體,氧化降解;分泌IL-1,TNFbeta和IL-6,可重復(fù)地響應(yīng)外源生長因子。NR8383細胞響應(yīng)博萊霉素,分泌TGFbeta前體。在博萊霉素刺激下,TGFbe;傳代方法:1:2傳代;生長特性:半貼壁生長;形態(tài)特性:巨噬細胞;相關(guān)產(chǎn)品有:HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞
CCRF/CEM-C7 Cells;背景說明:急性T淋巴細胞白血病;女性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:懸浮;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
UPCI-SCC-090 Cells;背景說明:舌鱗癌細胞;男性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞
PL-9 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
PL-9 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
HCC-4006 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:4-1:6傳代,每周2-3次。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮細胞樣;相關(guān)產(chǎn)品有:SNU869細胞、H-841細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞
HEL299 Cells;背景說明:紅白細胞白血病;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:懸浮;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
Hep-3B Cells;背景說明:肝癌;男性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
HCC-1143 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2—1:4傳代,每周換液2—3次;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
PL 45 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞
PLA-801C Cells;背景說明:肺巨細胞癌;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞
MFD-1 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻介紹;傳代方法:維持細胞濃度在3×104-5×105 cells/ml;2-3天換液1次。;生長特性:懸浮生長;形態(tài)特性:淋巴母細胞樣 ;相關(guān)產(chǎn)品有:LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
HO-8910 Cells;背景說明:HO-8910細胞株是1994年從一位51歲的中國卵巢癌患者腹水中建立的。 轉(zhuǎn)移到裸鼠中形成的腫瘤集聚與患者原病灶處的形態(tài)一致。;傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
BHK Cells倉鼠腎成纖維細胞|有STR圖譜
MuM-2B Cells人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞|有STR圖譜
ACT I Cells人甲狀腺癌細胞|有STR圖譜
WB-F344 Cells大鼠肝上皮樣干細胞|有STR圖譜
ZR-75-30 Cells人乳腺癌細胞|有STR圖譜
SJCRH30 Cells人骨髓橫紋肌肉癌細胞|有STR圖譜
B16/OVA Cells小鼠黑色素瘤細胞|有STR圖譜
LMH Cells雞肝癌細胞|有STR圖譜
HK-2 [Human kidney] Cells人腎小管上皮細胞|有STR圖譜
Panc 10.05 Cells人胰腺癌細胞|有STR圖譜
22Rv1 Cells人前列腺癌細胞|有STR圖譜
NCI-H1437 Cells人肺癌細胞|有STR圖譜
SW780 Cells人膀胱移行細胞癌細胞|有STR圖譜
SW620-GFP Cells人結(jié)直腸腺癌細胞|有STR圖譜
A2780+GFP Cells人卵巢癌細胞|有STR圖譜
HCC1937 Cells人乳腺癌細胞|有STR圖譜
HS-5 Cells人骨髓基質(zhì)細胞|有STR圖譜
EB3 [Human Burkitt lymphoma] Cells人Burkitt's淋巴瘤細胞|有STR圖譜
U87 MG-GFP Cells人惡性膠質(zhì)瘤細胞|有STR圖譜
HT-29-Luc Cells人結(jié)腸癌細胞|有STR圖譜
BPH-1 Cells人前列腺增生細胞|有STR圖譜
HeLa-RFP Cells人宮頸癌細胞|有STR圖譜
SKNO-1 Cells人急性髓系白血病細胞|有STR圖譜
ARH-77 Cells人漿細胞白血病細胞|有STR圖譜
LS1034 Cells人結(jié)腸腺癌細胞|有STR圖譜
NP69SV40T Cells人鼻咽上皮細胞|有STR圖譜
COLO 205-Luc Cells人結(jié)腸癌細胞|有STR圖譜
T2 Cells人淋巴母細胞|有STR圖譜
Neuro-2a Cells小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞|有STR圖譜
CCRF S-180 II Cells小鼠腹水瘤細胞|有STR圖譜
MDCK-I Cells犬腎細胞|有STR圖譜
RM-1+LUC Cells小鼠前列腺癌細胞|有STR圖譜
CL-11 Cells人結(jié)腸癌細胞|有STR圖譜
OAW42 Cells人卵巢癌細胞|有STR圖譜
SW10 Cells小鼠神經(jīng)元細胞|有STR圖譜
HT22 Cells小鼠海馬神經(jīng)元細胞|有STR圖譜
HCMEC Cells人心臟微血管內(nèi)皮細胞|有STR圖譜
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公司提供ATCC、DSMZ、ECACC、NCI-DTP、RCB(Riken)等細胞系