過(guò)氧化物酶(Peroxidase,POD)試劑盒說(shuō)明書
微量法 100 管/96 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
POD(EC 1.11.1.7)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,可催化過(guò)氧化氫氧化酚類和胺類 化合物,具有消除過(guò)氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。
測(cè)定原理:
POD 催化 H2O2 氧化特定底物,在 470nm 有特征光吸收。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水 。
粗酶液提取:
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(10 4個(gè)): 提取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或 細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰 上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提 取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 470nm,蒸餾水調(diào)零。
2、工作液的配制:臨用前將試劑一、試劑二、試劑三按照 2.6(ml):1.5(μl):1(μl)的比例混勻; 在 37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 10min 以上;現(xiàn)配現(xiàn)用。
3、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μl 樣本和 190μl 工作液,混勻,記錄 470nm 下 1min 時(shí)吸光值 A1 和 2min 后的吸光值 A2。計(jì)算ΔA=A2-A1。
注意:
如果ΔA 小于 0.005,可將反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)到 5min。如果ΔA 大于 0.5,可將樣本用提取液稀釋后測(cè)定, 計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
溫馨提示:本產(chǎn)品不可用于臨床,詳詢客服。
關(guān)鍵字: 過(guò)氧化物酶(POD)含量檢測(cè);
伊勢(shì)久(江蘇連云港)生物科技有限責(zé)任公司,成立于2019年,坐落于新亞歐大陸橋東方橋頭堡連云港市。公司由資深行業(yè)專家和雙一流高校博士聯(lián)合創(chuàng)辦,主要從事生化檢測(cè)、病理檢測(cè)和原料酶等相關(guān)試劑的研發(fā)和生產(chǎn)。
我司位于聯(lián)東U谷科技創(chuàng)新谷內(nèi)的2000平米的生產(chǎn)、研發(fā)基地已建成投入運(yùn)行,其中包括150平米的超十萬(wàn)級(jí)的潔凈車間。我司堅(jiān)持以自主研發(fā)為核心,現(xiàn)已生產(chǎn)出的脲酶、tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制劑等產(chǎn)品,熱銷市場(chǎng)以來(lái)收到了客戶的廣泛好評(píng)。
公司秉承“ 摯誠(chéng)科研、匠心傳承” 的發(fā)展理念,聚焦于前沿生物技術(shù)的應(yīng)用和創(chuàng)新,努力成為生物科技領(lǐng)域的標(biāo)桿企業(yè)。堅(jiān)持以客戶為中心,致力于為中國(guó)的科研工作者提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和專業(yè)服務(wù),始終是我們努力的目標(biāo)和方向。