FLAG peptide，即FLAG多肽，是一種由八個氨基酸組成的多肽，其序列為Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys（單字母表示為DYKDDDDK）。以下是對FLAG peptide的詳細(xì)描述：

一、基本特性

• ?分子式與分子量?：FLAG peptide的分子式通常為C41H60N10O20（也有資料給出略有差異的分子式，如C49H69N15O12，這可能是由于不同合成條件或后處理步驟導(dǎo)致的），平均分子量約為1012.97 Da（精確分子量可能略有差異）。

• ?等電點(diǎn)?：等電點(diǎn)（PI）約為4.51（也有資料給出4.16的等電點(diǎn)值，這同樣可能是由于實驗條件或測定方法的差異）。

• ?電荷特性?：在生理pH條件下，F(xiàn)LAG peptide帶有顯著的負(fù)電荷，這主要?dú)w因于其序列中多個帶負(fù)電荷的天冬氨酸殘基。

• ?親水性?：FLAG peptide具有良好的親水性，這與其富含極性氨基酸（如天冬氨酸和賴氨酸）有關(guān)。

二、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

• ?線性結(jié)構(gòu)?：FLAG peptide通常以線性結(jié)構(gòu)存在，其序列中的氨基酸殘基通過肽鍵連接。

• ?腸激酶切割位點(diǎn)?：FLAG peptide的C末端五個氨基酸殘基（Asp-Asp-Asp-Asp-Lys）是腸激酶的特異性識別位點(diǎn)，這使得在需要時可以通過腸激酶處理將FLAG標(biāo)簽從融合蛋白上切除。

三、功能與應(yīng)用

• ?抗原表位標(biāo)簽?：FLAG peptide是一種常用的抗原表位標(biāo)簽，可以通過基因工程技術(shù)融合到目標(biāo)蛋白的N端、C端或其他合適的位置。這樣，目標(biāo)蛋白就能夠被抗FLAG抗體特異性識別和結(jié)合，從而方便后續(xù)的蛋白質(zhì)檢測、純化和定位等研究。

• ?蛋白質(zhì)純化?：利用抗FLAG抗體或親和樹脂，可以高效地捕獲和純化帶有FLAG標(biāo)簽的融合蛋白。這種方法適用于從復(fù)雜樣品（如細(xì)胞裂解液、組織提取物或發(fā)酵液）中分離目標(biāo)蛋白。

• ?蛋白質(zhì)檢測與鑒定?：通過Western印跡、酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）、免疫熒光、免疫共沉淀等免疫學(xué)方法，可以檢測和定量分析帶有FLAG標(biāo)簽的融合蛋白。

• ?蛋白質(zhì)功能研究?：由于FLAG標(biāo)簽通常不會改變蛋白質(zhì)的自然構(gòu)象和功能，因此可以在不干擾蛋白質(zhì)生物學(xué)活性的前提下，對其進(jìn)行后續(xù)的功能性研究。

四、儲存與注意事項

• ?儲存條件?：FLAG peptide應(yīng)在干燥、低溫條件下儲存，以保持其活性和穩(wěn)定性。通常建議儲存在-20℃或更低溫度下。

• ?避免反復(fù)凍融?：為避免反復(fù)凍融對肽段造成損傷，建議將FLAG peptide分成小份保存，每次使用時取出一份，用完即棄。

綜上所述，F(xiàn)LAG peptide作為一種高度特異性和識別性的多肽標(biāo)簽，在蛋白質(zhì)科學(xué)研究領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。