糖原PAS染色液

簡介：

糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一，McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白，該法常用來顯示糖原和其他多糖，該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑，它能氧化糖類及有關物質中的1，2-乙二醇基，使之變?yōu)槎?，醛與Schiff試劑能結合成一種品紅化合物，產生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細胞內其他物質，使用時應注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化，這是很關鍵的步驟。? 

BIOISCO糖原PAS染色液(培養(yǎng)細胞專用)專門用于培養(yǎng)細胞的染色，是采用BIOISCO特有配方技術，大大增強了染色效果；性能穩(wěn)定，特異性強；操作簡捷，僅需1h;。該試劑適用于科研領域，不適用于臨床診斷。

組成：

保存條件：。

一年有效。

自備材料：

1、10%福爾馬林固定液

2、蒸餾水

3、系列乙醇

操作步驟(僅供參考)：

1. 常規(guī)固定，常采用10%福爾馬林固定液，常規(guī)脫水包埋。

2. 石蠟切片二甲苯或脫蠟透明液脫蠟入蒸餾水﹔冰凍切片直接入蒸餾水。

3. 自來水沖洗2~3min，再用蒸餾水浸洗2次。入過碘酸溶液室溫氧化。

4. 入過碘酸溶液室溫放置5~8min，一般不宜超過10min。

5. 自來水沖洗1次，再用蒸餾水浸洗2次。

6. 入Schiff Reagent置于室溫陰暗處浸染10～20min，自來水沖洗10min。

7. 入蘇木素染色液，染細胞核1~2min，酸性乙醇分化液分化2~5s。

8. 自來水沖洗10~15min，更換蒸餾水清洗，使其返藍。

9. 逐級常規(guī)乙醇脫水，二甲苯或脫蠟透明液透明，中性樹膠封固。

染色結果：? 

備注：顏色深淺很大程度上取決于樣品在過碘酸溶液和Schiff?Reagent中作用時間的長短。? 

陰性對照(可選)：

1、取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3)100ml，處理30~60min，與其他切片共同入過碘酸溶液。結果應為陰性。

2、(備選方案)取唾液片(過濾后用)處理30~60min，與其他切片共同入過碘酸溶液。結果應為陰性。

3、(備選方案)如果對照片采用其自身樣本，對照片不經過碘酸溶液這一步，直接入SchiffReagent，結果應為陰性。

注意事項：

1. 過碘酸氧化時間不宜過久，氧化時的溫度以18～22℃最佳。

2. 過碘酸溶液、SchiffReagent、蘇木素染色液應置于4℃密閉保存，使用時避免接觸過多的陽光和空氣，使用前最好提前30min取出恢復至室溫，避光暗處使用。

3. 過碘酸和Schiff中作用時間非常重要，該依據切片厚薄、細胞或組織的類別等決定。

4. 本試劑常用于細胞、極其薄的切片，如果常規(guī)切片建議采購糖原PAS染色液。

5. 切片脫蠟應盡量干凈，否則影響染色效果。

6. 酸性乙醇分化液應經常更換新液，其分化時間應該依據切片厚薄、組織的類別和分化液的新舊而定，另外分化后自來水沖洗時間應該足夠。

7. 冷凍切片染色時間盡量要短。