BD Horizon? CFSE(羧基熒光素琥珀酰亞胺酯)是一種高效、穩(wěn)定的熒光染料,專為細(xì)胞增殖分析與細(xì)胞追蹤研究設(shè)計(jì)。該產(chǎn)品通過流式細(xì)胞術(shù)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞分裂的精準(zhǔn)監(jiān)測,廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、腫瘤生物學(xué)及藥物研發(fā)領(lǐng)域。
核心功能與技術(shù)原理
細(xì)胞增殖追蹤CFSE染料可穿透細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞后被酯酶切割,釋放熒光羧基熒光素分子,并與細(xì)胞內(nèi)蛋白共價(jià)結(jié)合。隨著細(xì)胞分裂,熒光強(qiáng)度逐代減半,通過流式細(xì)胞術(shù)可定量檢測細(xì)胞分裂次數(shù)。例如,未刺激的淋巴細(xì)胞呈現(xiàn)單一高熒光峰,而激活后細(xì)胞呈現(xiàn)多個(gè)熒光峰,直觀反映增殖代數(shù)。
細(xì)胞內(nèi)染色與功能分析支持細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子(如IL-2)或轉(zhuǎn)錄因子(如Foxp3)的染色,兼容BD Phosflow?等試劑盒,可同步分析細(xì)胞活化狀態(tài)與增殖能力。
多色流式兼容性激發(fā)波長490nm,發(fā)射波長520nm,適配BD LSRFortessa?、FACSCanto? II等主流流式細(xì)胞儀,可與熒光抗體聯(lián)用進(jìn)行多參數(shù)分析。
產(chǎn)品優(yōu)勢
高靈敏度與穩(wěn)定性熒光信號衰減規(guī)律明確,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性高,支持長期細(xì)胞追蹤研究。
操作靈活性推薦工作濃度1-10μM,可通過調(diào)整濃度優(yōu)化染色強(qiáng)度,但需注意高濃度可能增加細(xì)胞毒性。
實(shí)驗(yàn)兼容性支持甲醛固定及皂苷類透化處理,適用于后續(xù)細(xì)胞內(nèi)分子檢測,如細(xì)胞周期分析或信號通路研究。
實(shí)驗(yàn)流程與存儲(chǔ)
試劑配制提供2瓶500μg/瓶的染料,建議用DMSO配制10mM儲(chǔ)存液,分裝后-20℃避光保存,穩(wěn)定期3個(gè)月。
染色步驟細(xì)胞洗滌后,在37℃下與CFSE孵育10-15分鐘,洗滌后即可進(jìn)行培養(yǎng)或分析。
數(shù)據(jù)分析配合FlowJo等軟件,可生成細(xì)胞分裂代數(shù)直方圖及統(tǒng)計(jì)報(bào)表,支持大規(guī)模樣本分析。
應(yīng)用領(lǐng)域
免疫學(xué)研究:評估T細(xì)胞、B細(xì)胞在抗原刺激下的增殖反應(yīng)。
腫瘤生物學(xué):監(jiān)測腫瘤細(xì)胞體外增殖能力及藥物敏感性。
藥物研發(fā):篩選免疫調(diào)節(jié)劑,如PD-1抑制劑對T細(xì)胞增殖的影響。
細(xì)胞治療質(zhì)控:驗(yàn)證CAR-T細(xì)胞體外擴(kuò)增效率。
規(guī)格與存儲(chǔ)
包裝規(guī)格:1mg/支,貨號565082,RUO(研究用途)級別。
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,復(fù)溶后分裝以減少凍融次數(shù)。
總結(jié)BD Horizon? CFSE憑借其精準(zhǔn)的增殖追蹤能力、靈活的實(shí)驗(yàn)兼容性及穩(wěn)定的熒光性能,成為細(xì)胞動(dòng)態(tài)研究領(lǐng)域的核心工具。無論是基礎(chǔ)科研還是藥物開發(fā),該產(chǎn)品均可提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)支持,助力揭示細(xì)胞增殖的分子機(jī)制與調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。
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