產(chǎn)品概述
腸激酶（ Enterokinase ，EK）是一種常見的絲氨酸蛋白酶，可以專一識別 DDDDK 序列并在賴氨酸殘基的C 端進行切割 。本品在天然腸激 酶輕鏈片段的基礎(chǔ)上進行突變改造，具有更高的比活和酶切特異性，可以在較寬的 pH 范圍（4.5-9.5）和溫度范圍（4 ~ 45℃) 內(nèi)進行有效 切割。
產(chǎn)品組分
1 、高特異性：諾唯贊自主研發(fā)改造，針對司美格魯肽，RM1025特異性顯著優(yōu)于普通腸激酶RM1011；
2、產(chǎn)能充足：5噸級生產(chǎn)線多批次生產(chǎn)，批產(chǎn)達億U級別，多批次生產(chǎn)驗證質(zhì)量穩(wěn)定；
3 、GMP級：生產(chǎn)過程符合GMP要求；
4 、質(zhì)量文件完整：可保障無動物源性、無外源性病毒污染等，質(zhì)量文件齊全。
5、質(zhì)檢體系完善：配套專一性酶活、酶殘留檢測試劑盒，提供入場檢支撐、雜質(zhì)風(fēng)險控制策略；
6、規(guī)格定制：規(guī)格可根據(jù)客戶需求定制。
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | Recombinant Enterokinase（High specificity） |
表達宿主 | 重組 E.coli |
性狀 | 澄清液體 |
活性單位定義 | 在 25℃ , 12 h-16 h 之內(nèi)，將 0.5 mg 保存于 25 mM Tris-HCl（pH 8.0）緩沖液中的融合蛋白切割 95%所需的酶量 ，定義為 1 U。 |
保存條件
儲存條件 ：-30 ~ -15℃ ;
復(fù)驗期：24 個月。
產(chǎn)品應(yīng)用范圍
1 、用于切除重組蛋白 N 端融合標簽；
2 、用于活化胰蛋白酶原；
3 、生物制藥領(lǐng)域常用于重組蛋白 、多肽類藥物的生產(chǎn)制備 ，例如 BNP 、GLP-1 及其類似物等。
建議反應(yīng)體系
酶切體系 ：1 U 可酶切融合蛋白 500-2000 μg ，pH 7.5-9.0；
反應(yīng)時間：25℃反應(yīng)過夜或者 24 h ，用 SDS-PAGE 或者 HPLC 檢測酶切效果；
4℃反應(yīng)酶切 ，需要將酶切時間延長至 48-64 h ，或增加 2-3 倍酶量。
注意事項
1 、在＞200 mM 咪唑 ，或＞200 mM NaCl ，或＞5%甘油條件下 ，酶切效果受影響 ，可將樣品進行稀釋或者透析 ，再進行酶切 。如果樣品 溶液中含有上述成分中的一種或多種，且不便去除，此時適當增加酶量或延長酶切時間，也可達到較好的酶切效果。磷酸鹽對 Enterokinase 發(fā)揮活性有影響 ，因此盡量避免酶切體系內(nèi)磷酸鹽的存在。
2 、本司生產(chǎn)的腸激酶比活高 ，使用過程中加量較少 ，可不考慮去除 。如果需要進一步降低殘留水平，建議的去除方法如下：
a. 使用親和層析 ，可以利用苯甲脒親和填料純化去除 ，由于腸激酶是一種絲氨酸蛋白酶 ，可以在純化時與苯甲脒填料結(jié)合 ，從而達到 去除目的；
b. 使用離子交換層析 ，可以利用目的蛋白與腸激酶電荷差異將二者進行分離；
c. 本產(chǎn)品含有 His標簽 ，可使用 Ni 柱親和層析吸附去除。
3 、推薦反應(yīng)體系是基于我司實驗條件下所獲得 ，使用時可根據(jù)實際情況進行調(diào)整。
關(guān)鍵字： 高特異性;腸激酶;
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