纖維素酶(cellulase,CL)/羧甲基纖維素酶活性測定試劑盒說明書
微量法 100管/48樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
CL(EC 3.2.1.4)存在于細(xì)菌、真菌和動(dòng)物體內(nèi),能夠催化羧甲基纖維素降解,是一類可廣泛應(yīng)用于醫(yī) 藥、食品、棉紡、環(huán)保及可再生資源利用等領(lǐng)域的酶制劑。
測定原理:
采用蒽酮比色法測定CL催化羧甲基纖維素鈉降解產(chǎn)生的還原糖的含量。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰、濃硫酸和蒸餾水。
樣品測定的準(zhǔn)備:
1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(10 4個(gè)):提 取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì) 胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上 待測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取 液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)樣品:直接檢測。
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