血清低密度脂蛋白(Low density lipoprotein cholesterol , LDL-C)試劑盒說明書
微量法 100管/96樣
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
低密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,與冠心病的發(fā)生和動脈粥樣硬化損傷呈正相關(guān),是脂類疾病分類和風險預(yù)測的一個重要指標。
測定原理:
用沉淀劑分離血清中的低密度脂蛋白膽固醇,利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸,從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC;進一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。
組成:
產(chǎn)品名稱 | FA036-100T/96S | Storage |
試劑一:液體 | 20ml | 4℃ |
試劑二:液體 | 15ml | 4℃ |
試劑三:粉劑 | 1瓶 | -20℃ |
試劑四:液體 | 10ml | 4℃ |
標準品:液體 | 1ml | 4℃ |
說明書 | 一份 |
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存。臨用前加5ml試劑四充分溶解。
自備儀器和用品:
離心機,恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
樣品處理:
取血后3小時內(nèi)分離血清,將血清樣品與試劑一按照2:1的比例充分混勻,25℃靜置15min,2000g離心15min,上清置于冰上待測。
測定操作表:
| 空白管 | 標準管 | 測定管 |
蒸餾水(μl) | 4 |
|
|
標準品(μl) |
| 4 |
|
樣本(μl) |
|
| 4 |
試劑二(μl) | 150 | 150 | 150 |
試劑三(μl) | 50 | 50 | 50 |
混勻,37℃靜置30min,于1ml玻璃比色皿,空白管調(diào)零,測定500nm處吸光值A(chǔ)。分別記為A標準管和A測定管 |
計算公式:
用微量石英比色皿測定的計算公式如下
LDL-C含量(mmol/L)= A測定管÷A標準管×C標準管
=5×A測定管÷A標準管
C標準管:5mmol/L
b.用96孔板測定的計算公式如下
LDL-C含量(mmol/L)= A測定管÷A標準管×C標準管
=5×A測定管÷A標準管
C標準管:5mmol/L
注意事項:
樣本切勿反復(fù)凍融,最好在取血后12小時內(nèi)完成測定。
配置好的試劑三4℃保存可半個月。
線性范圍為0.17mmol/L- 4.2mmol/L。
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