乙醇含量測定試劑盒說明書
可見分光光度法 50管/48樣
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
乙醇俗稱酒精，是最常見的一元醇，在檢測酒的質(zhì)量、分析血液乙醇含量和果蔬品質(zhì)判斷中通常需要頻繁、大量地檢測乙醇含量。
1.乙醇是酒的主要成分，是衡量酒質(zhì)量的重要指標(biāo)之一。我國是世界上最早發(fā)明釀酒的國家，也是酒類產(chǎn)品消費大國，其消費量居世界之首。因此，快速、準(zhǔn)確測定酒中乙醇含量，對于確保酒的質(zhì)量和保護(hù)消費者的健康具有重大意義。
2.乙醇是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最基本的抑制物，如果乙醇被大量攝入，會不可逆抑制呼吸甚至導(dǎo)致死亡，血液中乙醇檢測結(jié)果通常作為認(rèn)定是否酒后駕駛或醉酒駕駛的依據(jù)。
3.乙醇是判斷儲藏過程中果蔬品質(zhì)變化的重要指標(biāo)，研究表明，適當(dāng)?shù)囊掖继幚砟軌驕p少腐爛和減輕果蔬生理病害、延緩果蔬成熟和衰老進(jìn)程，從而延長貨架壽命。因此，簡便、準(zhǔn)確和快速測定果蔬中乙醇含量具有非常重要的意義。
測定原理：
乙醇在乙醇脫氫酶的催化下氧化脫氫生成乙醛，同時，NAD被還原生成NADH，NADH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色，通過450 nm下測定吸光值變化可測得乙醇含量。
組成：
產(chǎn)品名稱 | CE022-50T/48S | Storage |
試劑一：液體 | 1瓶 | -20℃ |
試劑二：粉劑 | 1瓶 | -20℃ |
試劑三：液體 | 20 ml | 4℃ |
試劑四：液體 | 3ml | 4℃避光 |
說明書 | 一份 |
試劑一：臨用前加30ml蒸餾水混勻，如一次用不完可根據(jù)需求量按照試劑一：蒸餾水=1:1200進(jìn)行稀釋；試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入15 ml試劑三充分溶解待用，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
乙醇提取：
組織：按照組織質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml蒸餾水），進(jìn)行勻漿，8000g，25℃離心10min，取上清待測。
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：蒸餾水體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml蒸餾水），超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）， 8000g，25℃離心10min，取上清待測。
血清（漿）等液體樣品：直接測定。
測定步驟：
分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至450nm。
工作液的配制：臨用前按照樣本數(shù)量，按以下比例配制工作液
試劑名稱 | 體積（μl） |
試劑一 | 500 |
試劑二 | 250 |
試劑四 | 50 |
樣本測定
按下表加入如下試劑
試劑名稱 | 體積（μl） |
測定工作液 | 800 |
工作液需提前在37℃避光溫育2min后加入樣本 |
樣本 | 200 |
混勻后記錄450nm下測定初始吸光值A(chǔ)1，和37℃避光孵育10min后的吸光值A(chǔ)2，計算
△A=A2-A1。
乙醇含量計算：
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 0.0512x + 0.0055 R2 = 0.9991；
x為乙醇含量（μmol/ml），y為吸光值差值△A。
按照血清（漿）體積計算
乙醇含量（μmol/ml）= (△A-0.0055)÷0.0512
=19.5×(△A-0.0055)
按照樣品質(zhì)量計算
乙醇含量（μmol/g鮮重）= [ (△A-0.0055)÷0.0512×V1]÷(W ×V1÷V2）
= 19.5×(△A-0.0055)÷W
按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計算
乙醇含量（μmol/104 cell）= [ (△A-0.0055)÷0.0512×V1]÷（500×V1÷V2）
=0.039×(△A-0.0055)
V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.2ml；V2：加入提取液體積，1 ml； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500萬；
注意事項：
測定前取1-2個樣做預(yù)實驗，若△A﹥0.6或乙醇含量﹥10μmol/ml，需將樣本用蒸餾水稀釋后再測定，以確保測定的準(zhǔn)確性，公式中乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
最低檢測限：0.02μmol/ml。
關(guān)鍵字： 乙醇含量檢測試劑盒;
伊勢久（江蘇連云港）生物科技有限責(zé)任公司，成立于2019年，坐落于新亞歐大陸橋東方橋頭堡連云港市。公司由資深行業(yè)專家和雙一流高校博士聯(lián)合創(chuàng)辦，主要從事生化檢測、病理檢測和原料酶等相關(guān)試劑的研發(fā)和生產(chǎn)。
我司位于聯(lián)東U谷科技創(chuàng)新谷內(nèi)的2000平米的生產(chǎn)、研發(fā)基地已建成投入運行，其中包括150平米的超十萬級的潔凈車間。我司堅持以自主研發(fā)為核心，現(xiàn)已生產(chǎn)出的脲酶、tRNA轉(zhuǎn)運核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制劑等產(chǎn)品，熱銷市場以來收到了客戶的廣泛好評。
公司秉承“ 摯誠科研、匠心傳承” 的發(fā)展理念，聚焦于前沿生物技術(shù)的應(yīng)用和創(chuàng)新，努力成為生物科技領(lǐng)域的標(biāo)桿企業(yè)。堅持以客戶為中心，致力于為中國的科研工作者提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和專業(yè)服務(wù)，始終是我們努力的目標(biāo)和方向。