非蛋白巰基測定試劑盒說明書
分光光度法 50 管/24 樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
生物體內(nèi)巰基主要包括非蛋白質(zhì)巰基和蛋白質(zhì)巰基。巰基化合物在體內(nèi)具有重要的解毒功能,對生物 體的自我調(diào)節(jié)具有非常重要的生理意義。 測定原理:
巰基基團(tuán)與 5,5’- 二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng),生成黃色化合物,在 412nm 處有最大吸收峰。
自備儀器和用品:
天平、研缽、可見分光光度計、恒溫水浴鍋、1ml 玻璃比色皿、乙醇和蒸餾水。
樣品的制備:
1. 按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液)進(jìn) 行冰浴勻漿,然后 8000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2. 血清,培養(yǎng)液:取 0.1ml 樣本,加入 0.4ml 提取液,混勻,室溫靜置 10min, 然后 8000g,4℃離心 10min, 取上清,置冰上待測。
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