一、簡(jiǎn)單描述
DiOC6(3)，是一種具細(xì)胞膜滲透性、發(fā)綠色熒光的親脂性染料。作為一種膜探針，DiOC6 (3)在高濃度下能對(duì)活細(xì)胞和固定細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（高爾基體）染色，也能對(duì)囊泡膜和線(xiàn)粒體染色。而在低濃度下，偏向選擇性染色線(xiàn)粒體。
DiOC6(3)能用來(lái)標(biāo)記活細(xì)胞。
神經(jīng)元和酵母細(xì)胞中，DiOC6(3)曾用來(lái)研究?jī)?nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）結(jié)構(gòu)的相互作用和動(dòng)力學(xué)；當(dāng)染料濃度提高或在某些呼吸缺陷的酵母菌株內(nèi)，DiOC6(3)能特異性染酵母核膜，而且具足夠靈敏性來(lái)揭式核膜的變化。
二、物理參數(shù)
英文名稱(chēng)：3，3'-Dihexyloxacarbocyanine iodide (DiOC6(3) iodide)
中文名稱(chēng)：3，3′-二己基含氧碳菁碘代物
CAS NO：53213-82-4
分子式：C29H37IN2O2
分子量：572.52
熔點(diǎn)：219-221°C
密度：1.2837
狀態(tài)：紅色粉末
Ex/Em：484/501nm（in methanol）
溶解性：溶于DMSO，DMF，無(wú)水乙醇，微溶于水
純度：≥95%
儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥
三、使用說(shuō)明
【注意】以下使用方法僅用作參考，可根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)條件和具體的應(yīng)用來(lái)做出調(diào)整。
1.染色液制備
儲(chǔ)存液制備：用 DMSO或無(wú)水乙醇配置濃度1～5 mM的儲(chǔ)存液。例如，取10mg DiOC6(3)溶于3.49ml 無(wú)水DMSO中，溶解后得到5mM的儲(chǔ)存液。
【注意】未使用的儲(chǔ)存液分裝儲(chǔ)存在-20℃，避免反復(fù)凍融，且要避光保存。
工作液制備：用緩沖液（如：無(wú)血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲(chǔ)存液，調(diào)整到1～5 μM的工作濃度。
【注意】：工作液最終濃度需要根據(jù)不同細(xì)胞系和實(shí)驗(yàn)體系來(lái)調(diào)整。
2.懸浮細(xì)胞染色
加入適當(dāng)體積的染色工作液重懸細(xì)胞，使其密度為1×106/mL。
37℃孵育細(xì)胞2～20min，不同的細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間不同?？梢?0min作為起始孵育時(shí)間。
孵育結(jié)束，按1000～1500 rpm離心5min。
去除上清液，之后輕柔加入37℃預(yù)熱的生長(zhǎng)培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。
再重復(fù)3），4）步驟兩次。
3.貼壁細(xì)胞染色
1）將貼壁細(xì)胞培養(yǎng)于無(wú)菌蓋玻片上。
2）從培養(yǎng)基中移走蓋玻片，濾掉過(guò)量培養(yǎng)液，將蓋玻片放在潮濕的小室內(nèi)。
3）在蓋玻片的一角加入100μL的染色工作液，輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。
4）37℃孵育細(xì)胞2～20min，不同的細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間不同?？梢?0min作為起始孵育時(shí)間。
5）吸掉染色工作液，用培養(yǎng)液洗蓋玻片2～3次，每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞，孵育5～10min，然后吸走培養(yǎng)基。
四、同類(lèi)型更多試劑
RH795膜電位熒光探針
Di-4-ANEPPS膜電位熒光探針
DiOC2(3)綠色膜電位熒光探針
WSP-5 (H2S Probe)硫化氫熒光探針
Cyanine 5.5 bissuccinimidyl ester
Cyanine 5 monosuccinimidyl ester
JC-10 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit
Rhodamine123羅丹明123（線(xiàn)粒體膜電位熒光探針）
Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
MKBio ER-Tracker Green for live-cell imaging 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)綠色熒光探針
ER-Tracker Red (BODIPYTM TR Glibenclamide), for live-cellimaging內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針
關(guān)鍵字： DiOC6(3);53213-82-4;3，3′-二己基含氧碳菁碘代物;
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