Mouse IL-4 ELISPOT Kit
組分(Materials Provided)

背景(Background)
眾所周知,IL-4是典型的調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子,在大量的免疫和非免疫功能中發(fā)揮作用。這種細(xì)胞因子通常由2型輔助T(TH2)細(xì)胞和濾泡輔助T(TFH)細(xì)胞在抗原致敏后分泌。小鼠IL-4 ELISpot測(cè)定法設(shè)計(jì)用于在單細(xì)胞水平檢測(cè)小鼠IL-4分泌細(xì)胞,可用于定量小鼠IL-4釋放細(xì)胞的頻率。ELISpot檢測(cè)具有高度的可重復(fù)性和敏感性,可用于測(cè)量頻率遠(yuǎn)低于十萬(wàn)分之一的反應(yīng)。ELISpot檢測(cè)不需要預(yù)先體外擴(kuò)增T細(xì)胞,它們適用于僅使用少量原代細(xì)胞的高通量分析。因此,ELISpot檢測(cè)是疫苗開發(fā)、細(xì)胞因子分泌和監(jiān)測(cè)各種臨床試驗(yàn)的有用工具。
應(yīng)用說明(Application)
該試劑盒用于在細(xì)胞水平檢測(cè)小鼠IL-4。
該產(chǎn)品僅用于科研。
重構(gòu)方法(Reconstitution)
復(fù)溶說明和具體濃度詳見分析證書。
存儲(chǔ)(Storage)
1.未開封的試劑盒應(yīng)在2℃-8℃條件下儲(chǔ)存。
2.在外包裝上找到有效期,不要使用超過有效期的試劑。
3.打開后請(qǐng)盡快用完。
原理(Assay Principles)
ELISpot檢測(cè)采用定量夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù)。該試劑盒由預(yù)包被的抗IL-4抗體微孔板、陽(yáng)性刺激物、生物素抗IL-14抗體、鏈霉抗生物素蛋白-HRP、AEC和緩沖液組成。
您的實(shí)驗(yàn)將包括6個(gè)簡(jiǎn)單步驟:
a) 一種針對(duì)小鼠IL-4的單克隆抗體已被預(yù)涂到聚偏二氟乙烯(PVDF)背襯的微孔板上。
b) 將適當(dāng)刺激的細(xì)胞移入孔中,將微孔板放入37°C的加濕CO2培養(yǎng)箱中一段時(shí)間。在此潛伏期內(nèi),分泌細(xì)胞附近的固定抗體結(jié)合分泌的IL-4。
c) 在洗掉任何細(xì)胞和未結(jié)合的物質(zhì)后,將對(duì)小鼠IL-4特異性的生物素化抗體加入孔中。在洗滌以去除任何未結(jié)合的生物素化抗體后,加入與鏈霉抗生物素蛋白結(jié)合的HRP。
d) 清洗平板,向平板中加入用稀釋緩沖液稀釋的鏈霉抗生物素-HRP。
e) 清洗盤子并添加AEC。紅棕色沉淀在細(xì)胞因子定位部位形成并表現(xiàn)為斑點(diǎn),每個(gè)斑點(diǎn)代表一個(gè)分泌IL-4的細(xì)胞。
f) 斑點(diǎn)可以用自動(dòng)ELISpot閱讀器系統(tǒng)或使用立體顯微鏡手動(dòng)計(jì)數(shù)。

關(guān)鍵字: IL-4 Kit;IL-4試劑盒;IL-4 ELISPOT試劑盒;ACRO;百普賽斯;
百普賽斯集團(tuán)ACROBiosystems Group(股票代碼:301080)是成立于2010年的跨國(guó)生物科技公司,是為全球生物醫(yī)藥、健康產(chǎn)業(yè)領(lǐng)域提供關(guān)鍵生物試劑產(chǎn)品及解決方案的行業(yè)平臺(tái)型基石企業(yè)。2021年在創(chuàng)業(yè)板上市。百普賽斯集團(tuán)業(yè)務(wù)遍布全球,橫跨亞洲、北美洲、歐洲,在中國(guó)、美國(guó)、瑞士等12個(gè)城市設(shè)有辦公室、研發(fā)中心及生產(chǎn)基地。目前累計(jì)服務(wù)客戶超6000家,與全球Top 20醫(yī)藥企業(yè)均建立了長(zhǎng)期、穩(wěn)定的合作伙伴關(guān)系。集團(tuán)旗下?lián)碛衅放艫CROBiosystems百普賽斯、bioSeedin柏思薈、Condense Capital墾拓資本和ACRODiagnostics百斯醫(yī)學(xué)等。