CV17-Zero Background pTOPO-Blunt Simple Cloning Kit(零背景平末端克隆,不含多克隆MCS)

產(chǎn)品介紹:
本制品和傳統(tǒng)的T4連接酶原理不同,它利用了Topoisomerase可以在瞬間(幾秒鐘-幾分鐘)、高效(接近100%)連接DNA片段的原理采用本公司獨創(chuàng)的工藝制成。
1. 平末端PCR產(chǎn)物不需要先加A,在瞬間(幾秒鐘-幾分鐘)完成平末端PCR產(chǎn)物連接。
2. 特制的新型載體質(zhì)粒大小僅僅不到2kb,充分發(fā)揮了TOPO載體越小,可容納片段越大的優(yōu)勢,最大限度提高了大片段連接效率;連接后質(zhì)粒大小比傳統(tǒng)載體小2kb以上,質(zhì)粒越小,轉(zhuǎn)化效率越高,極大的提高了各種片段連接后的轉(zhuǎn)化子數(shù)量。
3. 采用氨芐抗性載體只需10分鐘復蘇時間,比卡那抗性載體1小時復蘇時間縮短6倍。
4. 最快可以不用冰浴和熱休克,室溫5分鐘內(nèi)完成轉(zhuǎn)化;無需1小時復蘇,只需37℃10分鐘復蘇便可以涂板。從連接到涂板最快只需15-20分鐘。
5. 自殺基因零背景原理,無自連假陽性,無需繁瑣藍白斑篩選和菌落PCR篩選。大部分情況下隨機挑一個克隆便是有插入的(接近100%)。
6. 連接長片段能力遠超傳統(tǒng)Blunt克隆載體,可連接長達10kb片段(例如連接5kb片段,也可能達到挑10個菌落,至少8個是有插入的效果),是新一代世界領先的簡單、快速、零背景免篩選的TOPO Blunt平末端克隆載體。
本制品在克隆插入位點兩側不含多克隆酶切位點(Simple),需要時可在PCR擴增引物上導入合適的酶切位點。此時如果使用PCR擴增引物導入的酶切位點進行酶切時,酶切反應將不會受到載體上其它多克隆酶切位點影響,可大大提高酶切效率,增加亞克隆成功率。
注:本TOPO載體連接體系是按照10ml計算可以用20次,如果按照其它公司產(chǎn)品5ml計算,實際使用次數(shù)可以增加一倍,20次實際可用40次。
使用該產(chǎn)品發(fā)表的部分文章:
CV17 Zero Background pTOPO-Blunt Simple Cloning Kit::
1. Cloning and Expression Analysis of Citrate Synthase(CS)Gene in Camellia oleifera. Bulletin of Botanical Research 2016, 36(4): 556-564
2. Cloning and expression analysis of a autophagy-related protein 8 encoding gene in Polyporus umbellatus. Chin Med Biotechnol 2016, 11(5): 415-419
3. Cloning and expression of three thaumatin-like protein genes from Polyporus umbellatus. Acta Pharmaceutica Sinica B 2017, 7(3): 373–380
4. Development and application of an allele-specific PCR assay for detecting T409C mutation of cyp51 gene linked with tebuconazole resistance in Villosiclava virens (rice false smut) Canadian Journal of Plant Pathology 2017, 39(3)
5. LEA proteins from Gastrodia elata enhance tolerance to low temperature stress in Escherichia coli. Gene 2018, 646: 136-142
6. Complete genomic sequence of a novel macluravirus, alpinia oxyphylla mosaic virus (AloMV), identified in Alpinia oxyphylla. Archives of Virology 2018, https://doi.org/10.1007/s00705-018-3879-62
7. Complete nucleotide sequence of jasmine virus H, a new member of the family Tombusviridae. Archives of Virology 2018, 163(3): 731-735
8. Analysis of the complete genome sequence of a potyvirus from passion fruit suggests its taxonomic classification as a member of a new species. Archives of Virology 2018, https://doi.org/10.1007/s00705-018-3885-8
9. Endogenous pararetrovirus sequences are widely present in Citrinae genomes. Virus Research 2018, https://doi.org/10.1016/j.virusres.2018.05.018
10. Molecular cloning, polymorphism, and expression analysis of the LKB1/STK11 gene and its association with non-specific digestive disorder in rabbits. Molecular and Cellular 2018, https://doi.org/10.1007/s11010-018-3349-1
關鍵字: 零背景平末端克隆;
杭州昊鑫生物科技股份有限公司成立于2009年,產(chǎn)品和服務涵蓋生命科學研究技術的諸多方面,提供覆蓋分子生物學、細胞生物學、植物學、生物化學、蛋白組學、免疫學等領域的實驗產(chǎn)品以及生物技術服務等。目前一級代理品牌有:MCE(Medchemexpress)、Biochannel、AATbio、invivogen、Abnova、Atlas、Origene、Biovision、云克隆(Cloud-clone)、艾德萊(Aidlab)、Cayman、Jackson、Epigentek、Prospec、Sciencell、icellbioscience(賽百慷)、hkABCbio、chondrex、Mybiosource、Abbexa、Innovrsrch、HPI、Hitobiotec、Greerlabs,Ostex,4ADI,LDN等。