? 請不要在通風(fēng)口、陽光直射下檢測，以避免造成微孔微環(huán)境差異導(dǎo)致檢測失?。?/div>
? 標(biāo)準(zhǔn)品、陽性樣本以及用過的吸頭和器皿均應(yīng)做有毒廢棄物處理。
檢測前準(zhǔn)備
? 所有試劑需回復(fù)至室溫（在20-25℃下，從試劑盒中取出并放置1-2h）;
? 檢測開始前需準(zhǔn)備好所需試劑；
? 取出所需體積的試劑，其余放回盒內(nèi)；
? 未使用完的試劑請勿倒回原試劑瓶內(nèi)，移取每一種試劑需更換吸頭，以免交叉污染；
? 請不要在通風(fēng)口、陽光直射下檢測，以避免造成微孔微環(huán)境差異導(dǎo)致檢測失??；
? 標(biāo)準(zhǔn)品、陽性樣本以及用過的吸頭和器皿均應(yīng)做有毒廢棄物處理。
洗液（1×）配制
取1體積的20×濃縮洗液，加入19體積的去離子水或蒸餾水混勻
檢測步驟
(1) 移取50μL河豚毒素標(biāo)準(zhǔn)品至相應(yīng)微孔中；
(2) 移取50μL樣本至相應(yīng)微孔中；
(3) 移取50μL酶結(jié)合物至所有微孔中；
(4) 加入50μL河豚毒素抗體至每一所需微孔中，用手指肚輕輕敲擊微孔板架兩側(cè)混勻1min；
(5) 室溫（20-25℃）孵育30min；
(6) 甩干微孔板，加入300μL 洗液（1×），浸泡5s后倒出洗液，再重復(fù)4次，甩干并于無塵布上拍干；
(7) 加入100μL底物，室溫（20-25℃）避光孵育15min;
(8) 加入100μL終止液，于450nm下讀數(shù)
五、結(jié)果計算（1）以logit(B/B0）為y軸，以log（分析物濃度）為x，進行線性擬合。
其中公式如下
logit(B/B0)=k ln?〖(concentration)+c〗①
B為標(biāo)準(zhǔn)品或樣本對應(yīng)的吸光度；
B0為零標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)的吸光度；
logit(B/B0)=〖ln(〗?〖(B/B0)/(1-B/B0))〗;
K為斜率；
C為截距
（2）計算出樣本的平均吸光度和樣本的B/B0值代入公式①中求出濃度并乘以對應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即為樣本中待測物最終濃度