中文名：ROS熒光探針-DHE
英文名：ROS fluorescent probe DHE
英文別名：Hydroethidine | 5-ethyl-6-phenyl-5,6-dihydrophenanthridine-3,8-diamine | Dihydroethidium | 5-ethyl-5,6-dihydro-6-phenyl-3,8-phenanthridinediamine | 5-ethyl-6-phenyl-6H-phenanthridine-3,8-diamine
貨號：R353922
包裝：1ml
Cas號：38483-26-0
存儲溫度：避光,-20°C儲存
產(chǎn)品介紹：
ROS 熒光探針-DHE
產(chǎn)品規(guī)格：1 mL(5 mM in DMSO)
產(chǎn)品參數(shù)
Ex/Em: 355/420 nm
CAS號：38483-26-0
分子式：C21H21N3
分子量：315
儲存條件
-20℃避光保存，有效期見外包裝。
產(chǎn)品介紹
DHE(Dihydroethidium)，可自由透過活細胞膜進入細胞
內(nèi)，并被細胞內(nèi)的 ROS 氧化，形成氧化乙錠；氧化乙錠可
摻入染色體 DNA 中，產(chǎn)生紅色熒光。根據(jù)活細胞中紅色熒
光的產(chǎn)生，可以判斷細胞 ROS 含量的多少和變化。DHE 在
細胞內(nèi)主要被超氧陰離子型 ROS 氧化，用流式細胞儀或熒
光顯微鏡可直接觀察，是一種快速簡便的組織或培養(yǎng)活細胞
中 ROS 經(jīng)典檢測方法。
使用說明
1. 染色方法：
（1）探針溶液可在新鮮培養(yǎng)液、緩沖鹽溶液或組織灌流液中稀釋到所需濃度，以此染色液更換細胞培養(yǎng)液或灌流液；
也可直接向細胞孵育液或灌流液中加入探針至所需濃度。
（2）依據(jù)細胞ROS含量的不同，DHE終濃度可選擇在1
μM~100 μM的范圍，孵育時間可選擇10~90 min。孵育可在
37℃或室溫進行，要求避光。
（3）孵育結(jié)束后，用新鮮溶液清洗細胞或組織。
2. 熒光顯微照相操作方法：
（1）對貼壁生長細胞或活組織，可直接在熒光顯微鏡下觀
察；對懸浮生長細胞，取25-50 μL細胞懸液滴到一張顯微載
玻片上，再蓋上一張蓋玻片。
（2）熒光顯微鏡下，用藍光或綠光激發(fā)，觀察和拍攝細胞
紅色發(fā)射圖像，ROS陽性細胞在整個核區(qū)被染成紅色；用紫
外光激發(fā)時，胞漿中未氧化的DHE可發(fā)出藍色熒光。
3. 流式細胞分析操作方法：
（1）對貼壁生長細胞，用胰酶消化制備成單細胞懸液；對
懸浮生長細胞，直接收集細胞。用0.5~1 mL冰冷PBS重懸細
胞(5~10萬)。
（2）采用 480~535 nm 波長激發(fā)，測定 590 nm~610 nm 以
上的發(fā)射，細胞應可分成兩個亞群：ROS 陰性細胞僅有很
低的熒光強度，ROS 陽性細胞有較強的紅色熒光。
注意事項
1. DHE在光照和空氣中易被氧化，注意避光保存。
2. 該試劑可用于體外培養(yǎng)活細胞、培養(yǎng)或灌流組織及組織
冰凍切片的檢測。
3. 對不同的細胞和組織，應選擇合適的孵育時間和濃度，
以觀察 ROS 的變化。
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關鍵字： Hydroethidine ; 5-ethyl-6-phenyl-5,6-dihydrophenanthridine-3,8-diamine ; Dihydroethidium ; 5-ethyl-5,6-dihydro-6-phenyl-3,8-phenanthridinediamine
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