貨號:QR1016 規(guī)格:5 次/ 10次
保存:常溫保存,復(fù)檢期1年。(注:RNaseA以附件形式發(fā)貨,收到未使用前請-20℃保存)
試劑盒內(nèi)容:
試劑盒組成 | QR1016-5次 | QR1016-10次 | QR1016-20次 |
RNaseA | 2mL | 4mL | 7mL |
溶液Ⅰ | 50mL | 100mL | 200mL |
溶液Ⅱ | 50mL | 100mL | 200mL |
溶液Ⅲ | 75mL | 150mL | 300mL |
TE | 5mL | 10mL | 20mL |
說明書 | 1份 | 1份 | 1份 |
產(chǎn)品說明:
本試劑盒采用異丙醇沉淀法提取質(zhì)粒DNA,簡單易行,只需要常規(guī)離心機和幾種簡單的試劑,操作步驟較少。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測序、連接和轉(zhuǎn)化等實驗。
如非指明,所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
操作步驟(僅供參考):
1、取100-500 mL細菌培養(yǎng)物轉(zhuǎn)入500 mL離心管中,4000 rpm離心10 min,盡量吸除上清。
2、向留有菌體沉淀的離心管中加入 10 mL 溶液Ⅰ,使用旋渦振蕩器或其他方法徹底懸浮細菌細胞沉淀,懸浮沉淀需均勻,不應(yīng)留有小的菌塊。注意:如果菌塊未徹底混勻,會影響裂解導(dǎo)致質(zhì)粒提取量和純度偏低。
3、向離心管中加入10 mL溶液Ⅱ,溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次使菌體充分裂解。注意:混勻一定要溫和以免污染細菌基因組DNA,此時菌液應(yīng)變得清亮粘稠,作用時間不要超過5 min,以免質(zhì)粒受到破壞。
4、向離心管中加入15 mL溶液Ⅲ,立即溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次,充分混勻,此時會出現(xiàn)白色絮沉淀。
5、將上述液體在 -20 ℃放置30 min,4000 rpm離心20 min。
6、分別吸取上清液至新的離心管中,按1:100比例加入Rnase A,37 ℃孵育 39 min。
7、向離心管中加入等體積的異丙醇, -20 ℃沉淀60 min,4000 rpm離心20 min,棄上清。
8、加入70 %乙醇1 mL洗滌,4000 rpm 離心10 min,棄廢液。
9、室溫烘干質(zhì)粒,加入1 mL經(jīng)65℃水浴加熱的洗脫液 TE,室溫放置2 min,溶解質(zhì)粒。
10、電泳檢測質(zhì)粒純度,或者紫外分光光度計檢測濃度。
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關(guān)鍵字: 質(zhì)粒大量;大量提取;大量制備;Plasmid Midiprep;Max Purification Kit;
其云生物是一家以共享質(zhì)粒庫平臺為基礎(chǔ),提供多種科研技術(shù)服務(wù)的生物科技企業(yè)。其中本質(zhì)粒共享平臺內(nèi)收錄并保藏質(zhì)粒500余種,數(shù)量超過2000,包含大部分科研院所及機構(gòu)常用的質(zhì)粒載體,并為廣大科研工作者提供質(zhì)粒保藏服務(wù)及質(zhì)粒信息咨詢。本質(zhì)粒共享平臺有完善的質(zhì)粒收集和保藏制度、專業(yè)的數(shù)據(jù)庫管理已經(jīng)嚴謹便利的質(zhì)粒分發(fā)流程,以此確保質(zhì)粒庫平臺的高效有序進行,以滿足廣大科研工作者的需求。
同時,本公司在質(zhì)粒庫平臺的基礎(chǔ)上還提供多種分子生物學(xué)試劑:如HiFi一步克隆重組酶、高保真酶、dNTP mix等。其云生物公司提供多種常用分子克隆產(chǎn)品,物美價廉,是您科研道路上的良好選擇。
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