中文名稱:克羅諾桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒 | 品牌: 一研 |
產(chǎn)地: 國(guó)產(chǎn) | 保存條件: -20℃ |
產(chǎn)品類別: PCR試劑盒 PCR檢測(cè)試劑盒 | |
型號(hào): EY00P349 |
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 型號(hào) |
克羅諾桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒 | 50T | EY00P349 |
組成及試劑配制
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL水合紅菲繞啉二磺酸鈉水合物質(zhì)量規(guī)格:用于亞鐵離子的測(cè)定Bathophenanthrolinedisulfonic Di Salt Hydrate
THP1-Blue (穩(wěn)定株)單核細(xì)胞 THP1-Blue (stable sain) in human monocytes 1640+10% FBS(熱滅活)+200ug/ml Zeocin+0.05mM β-ME浴銅靈 (升華提)(>99.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC)(T)Bathocuproine (purified by sublimation)
IL17A Protein Human 重組 IL17 / IL17A 蛋白莫吉司坦質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMoguisteine
脈絡(luò)絲成纖維細(xì)胞 (HCPF)( 5×105 ) HUVEC, 臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 Caco-2,結(jié)直腸腺癌細(xì)胞莫吉司坦(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Moguisteine
CM-R017大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL糠酸莫米質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP31Mometasone furoate
糊精;白糊精質(zhì)量規(guī)格:BRDextrin Rat endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 HumanCandidaAlbicans,C.albicansELISA試劑盒人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸芐達(dá)明質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBenzidamine HCl Humahrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 人纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 HumanDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISAKit人脫氫表雄同S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(中顆粒)質(zhì)量規(guī)格:分類范圍3×100000Sephadex G-50 HumanapoproteinA1,apo-A1ELISA試劑盒人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 犬肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(粗顆粒)質(zhì)量規(guī)格:分類范圍3×100000Sephadex G-50 植物葉綠體外膜功能檢測(cè)試劑盒20 山羊雌二醇(E2)試劑盒 Goat Esadiol,E2 ELISA Kit
克羅諾桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒殺螟丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)Aramite solution質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3% Mouseα2-Aiplasmin,α2-APELISA試劑盒小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒 ,英文名: PP ELISA Kit
Amberlite?IRA402 強(qiáng)堿型陰離子交換樹脂(氯型)Amberlite? IRA402質(zhì)量規(guī)格:氯型 小鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 MouseypsinELISA試劑盒小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Amberlite XAD-1180N 非離子型多孔樹脂(粒徑0.350 - 0.600 mm)Amberlite? XAD1180N質(zhì)量規(guī)格:粒徑0.350 - 0.600 mm Rat platelet aibodies IgG/M/A (PA-IgG/M/A) ELISA Kit 大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒 Duckviruseeritis,DEVELISA試劑盒鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
嘧菌酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Azoxystrobin質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 Humandeltasleep-inducingpeptide,DSIPELISAKit 人促睡眠肽(DSIP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 HumanAndrostenedione,ASDELISAKit人雄烯二同(ASD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
使用方法:
一、樣品DNA的制備用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6,5,4,3,2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。6. 換槍頭,從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
成立日期 | 2014-06-05 (11年) | 注冊(cè)資本 | 100 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年?duì)I業(yè)額 | ¥ 100萬(wàn)以內(nèi) |
主營(yíng)行業(yè) | 生化試劑,抗體,細(xì)胞培養(yǎng),分子生物學(xué),免疫安全 | 經(jīng)營(yíng)模式 | 工廠,試劑 |
產(chǎn)品名稱 | 價(jià)格 | 公司名稱 | 報(bào)價(jià)日期 | |
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¥1490 |
VIP6年
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上海康朗生物科技有限公司
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2025-04-24 | |
¥3490 |
VIP6年
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上海澤葉生物科技有限公司
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2025-04-24 | |
¥3980 |
VIP4年
|
上海雅吉生物科技有限公司
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2025-04-24 | |
¥2899 |
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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2022-08-19 |