參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：蜂房蜜蜂球菌PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P712
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應孔數(shù)，一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
 Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293sars181AAmberlite XAD-4 非離子型大孔樹脂(粒徑0.49 - 0.69 mm)質(zhì)量規(guī)格：粒徑0.49 - 0.69 mmAmberlite XAD4

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) 茴香1(分析標準品，用于萜1分析，≥99.5% (GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標準品，用于萜1分析，≥99.5% (GC)trans-Anethole

CL-0224SW579(甲狀腺鱗癌細胞 )5×106cells/瓶×2山崳酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品Behenic

PARP1 Others Human  PARP-1 / PARP 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 乙基叔丁基(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品tert-Butyl ethyl ether

成纖維細胞cDNAHLF cDNAADP.Na2; 5'-二1酸腺苷二鈉/腺苷-5'-二1酸二鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：>95.0%,BRAdenosine-5'-diphosphate di salt(ADPna)

蜂房蜜蜂球菌PCR檢測試劑盒二苯甲酮(標準品))Benzophenone質(zhì)量規(guī)格：分析標準品  小鼠纖維膠凝蛋白1(FCN1)ELISA試劑盒 ，英文名： FCN1 ELISA Kit  ELISAKitAQP-3小鼠水通道蛋白3規(guī)格：48T/96T

鹽酸哌侖西平Pirenzepine di質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR  兔子α干擾素(IFN-α)ELISA檢測試劑盒RabbitIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T  Humanbasicfetoprotein，BFPELISAKit人堿性胎兒蛋白(BFP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

普拉洛芬Pranoprofen質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR  牛乙酰輔酶A(acetyl-CoA)試劑盒 Bovine acetyl-CoA ELISA kit  人球蛋白j鏈(Ig-j)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

普拉洛芬(標準品)Pranoprofen質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,標準品  英文名稱HumanEndothelin-1ELISAKit人內(nèi)皮素(ET-1)規(guī)格：96T/48T  小鼠髓過氧化物酶(MPO)試劑盒 Mouse myeloperoxidase,MPO ELISA Kit

尿酸Uric 質(zhì)量規(guī)格：0.99  人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)試劑盒 Human tuberculosis aibody IgG,TB-Ab IgG ELISA Kit  人糖基化終末產(chǎn)物(AGE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

溴化亞銅(>98%,BR)Copper(I) bromide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  Ratai-gonadoopin-releasinghormonereceptoraibody,GHR-AbELISAKit大鼠促性腺激素釋放激素受體抗體(GHR-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  豬β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)試劑盒 Pig β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit

無水乙酸銅(>99%,BR)Copper(II) acetate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR  組蛋白H3-K18(mono)甲基化檢測試劑盒10/20等  Humankeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit 人角化細胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

溴化銅(>99%,BR)Copper(II) bromide質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR  MouseangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISA試劑盒小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  Humanpancreatickininogenase,PKELISA試劑盒人胰激肽原酶(PK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T