一般描述
SPDP 試劑的胺反應(yīng)部分是 N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）酯。反應(yīng)最通常在 pH 7-8 的磷酸鹽、碳酸鹽/碳酸氫鹽或硼酸鹽緩沖液中進(jìn)行?？梢允褂闷渌话罚ɑ蛄虼蓟蚨蚧镞€原劑–參見(jiàn)巰基反應(yīng)性的討論）的緩沖劑。pH 值越高，反應(yīng)和水解降解的速率越大；例如，NHS 酯的半衰期在 pH 值為 7 時(shí)為數(shù)小時(shí)，而在 pH 值為 9 時(shí)不到 10 分鐘。SPDP 和 LC-SPDP 等 NHS 酯試劑的水溶性有限，在將其添加到反應(yīng)混合物之前，必須先將其溶于有機(jī)溶劑中。諸如 Sulfo-LC-SPDP 的 Sulfo-NHS-酯試劑是水溶性的，可以直接添加到水性反應(yīng)混合物中。
特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)
反應(yīng)性基團(tuán)：NHS 酯和吡啶基二硫醇對(duì)以下分子具有反應(yīng)性：氨基和巰基與游離巰基反應(yīng)時(shí)釋放出可檢測(cè)的副產(chǎn)物；通過(guò)測(cè)量 343 nm 處吡啶-2-硫酮的釋放，可以輕松地跟蹤反應(yīng)進(jìn)度間隔臂中的二硫鍵在pH 8.5條件下易于被10-50mM DTT或TCEP裂解減少 SDS-PAGE 上樣緩沖液，也易于使間隔臂裂解使用可裂解交聯(lián)劑，能夠?qū)崿F(xiàn)交聯(lián)產(chǎn)物的分離水不溶性（先溶于 DMF 或 DMSO）SPDP 交聯(lián)劑可透過(guò)膜，因此可以在細(xì)胞內(nèi)部進(jìn)行交聯(lián)與其他品種的 SPDP 型試劑進(jìn)行比較，包括聚乙二醇化形式
注意
這種產(chǎn)品對(duì)濕氣很敏感。小瓶包裝在帶有干燥劑的可再密封袋中，以減少濕氣接觸。冷藏后，打開(kāi)前將小瓶平衡至室溫，以減少小瓶?jī)?nèi)的冷凝。制備新的溶液。不建議儲(chǔ)存原液。使用后，將小瓶放回可重新密封的袋子中。封閉袋子，在推薦的溫度下儲(chǔ)存產(chǎn)品。
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