概述
重組牛腸激酶(Recombinant Bovine Enterokinase,rEK)為畢赤酵母(Pichia pastoris)表達(dá)后經(jīng)高度純化的重組制品。不同于大腸桿菌表達(dá)的基因工程腸激酶催化亞基,本產(chǎn)品中的重組牛腸激酶催化亞基具備對(duì)活性非常重要的糖基化修飾,因此具有極高的活性和專一的識(shí)別位點(diǎn)(DDDDK,Asp-Asp-Asp-Asp-Lys),并且切割速率較天然酶更快。
產(chǎn)品特性
本產(chǎn)品是重組表達(dá)的,不含牛源成份,并且表達(dá)時(shí)含有HIS-tag,可以通過(guò)金屬螯合層析去除。
產(chǎn)品類型
澄清, 無(wú)色至淡黃色液體。
活力
定義:在4℃,16小時(shí)內(nèi)將1毫克的BH-C質(zhì)控蛋白酶切95%以上所需的酶量定義為1個(gè)活性單位。(本產(chǎn)品37℃條件下具有更好的酶切活性)
本產(chǎn)品活性大于1u/μL。
試劑級(jí):
符合企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)Q/TS-BH04-004-2019
其它特性
純度:>95%(by SEC-HPLC,bSDS-PAGE)

圖例 重組腸激酶酶切反應(yīng):
每個(gè)反應(yīng)含有100μg的BH-C質(zhì)控蛋白和不同數(shù)量的腸激酶。在4℃經(jīng)過(guò)16小時(shí)的反應(yīng)后用15%的SDS-PAGE凝膠檢測(cè)酶切效果。每個(gè)反應(yīng)所含的酶量分別為:
Lane A: No rEK | Lane B: 0. 005U | Lane C: 0.01U |
Lane D: 0.015U | Lane E: 0.025U | Lane F: 0.04U |
Lane G: 0.05U | Lane H: 0.1U | Lane M: Marker |
1×重組牛腸激酶反應(yīng)緩沖液:
20mM Tris-HCl(pH 8.0),50mM NaCl,2mM
CaCl2,0.1% Tween-20
1×重組牛腸激酶儲(chǔ)存緩沖液:
20mM Tris-HCl(pH 8.0),100 mM NaCl,2mM CaCl2,50%甘油
如果樣品溶液中含有以下成分的一種或多種,對(duì)本產(chǎn)品有一定的影響:(濃度>0.5% Triton X-100,>0.5% Tween-20,>100mM DTT ,>250mM NaCl , >50mM Imidazole ,> 1mM PMSF ,>2M Urea ,>2M Guanidine)。為獲得理想的酶切結(jié)果,請(qǐng)先將樣品透析到1×反應(yīng)緩沖液中,然后再進(jìn)行酶切實(shí)驗(yàn)。
包裝
100μL到50000μL(凍存管)。
安全
酶是蛋白質(zhì)類物質(zhì),對(duì)于敏感的人來(lái)說(shuō)吸入酶霧滴有可能發(fā)生過(guò)敏,過(guò)長(zhǎng)時(shí)間接觸有可能刺激皮膚、眼睛和粘膜組織。
儲(chǔ)存
保存于-20℃。避免反復(fù)凍融,避免陽(yáng)光直曬,儲(chǔ)存期為24個(gè)月。本產(chǎn)品配至的穩(wěn)定性。然而隨時(shí)間的推移,酶會(huì)逐漸失去活力。延期儲(chǔ)存或不宜條件,如較高的溫度,會(huì)導(dǎo)致較高的添加量。
關(guān)鍵字: 重組牛腸激酶;
北京百華力適生物科技有限責(zé)任公司是一家專業(yè)從事重組蛋白、酶、細(xì)胞因子、診斷原料等產(chǎn)品的研發(fā)生產(chǎn)及化妝品研發(fā)的高科技企業(yè)。成立以來(lái),致力于藥用原料、工業(yè)用酶制劑、大健康領(lǐng)域酶制劑——微生物發(fā)酵溶菌酶、核酸酶、重組胰酶、過(guò)氧化酶等酶制劑研發(fā)、生產(chǎn)。同時(shí)致力于結(jié)構(gòu)生物學(xué)技術(shù)、蛋白質(zhì)工程技術(shù)及生物發(fā)酵工程技術(shù)開(kāi)發(fā)具有緊致、抗皺功能的凍干粉、面膜及相應(yīng)的生物活性原料等醫(yī)美產(chǎn)業(yè)領(lǐng)域。
自成立以來(lái),依靠?jī)?yōu)秀的管理團(tuán)隊(duì),雄厚的科研實(shí)力,完成了多種重組蛋白、生物活性酶、診斷原料、高活性的細(xì)胞因子的制備。公司視科研創(chuàng)新為企業(yè)的靈魂,不斷加強(qiáng)跟科研機(jī)構(gòu)的合作,目前已跟中科院、美國(guó)UAB大學(xué)、北京師范大學(xué)建立了長(zhǎng)期的合作,在蛋白結(jié)構(gòu)AI輔助下,人工進(jìn)化酶;與中科院合作以合成生物學(xué)、基因編輯技術(shù)研發(fā)表達(dá)體系的優(yōu)化。獲取了從基因、載體、表達(dá)系統(tǒng)、菌株、到發(fā)酵工藝等多項(xiàng)核心技術(shù),聯(lián)合并通過(guò)了ISO9001: 2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證。
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