本產品含DMSO在內的多種保護劑成分,內含的部分保護劑,易于穿透細胞,避免細胞內部水分子形成冰晶損傷細胞,
同時內含的另一些保護劑不能穿透細胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結合細胞外的水分子,
降低細胞外溶液的電解質濃度,減少陽離子進入細胞的數(shù)量。
本產品的多種保護劑在細胞內外進行雙重保護,大大提高了細胞復蘇存活率。
產品用途:
1.用于免疫細胞及干細胞的存儲。
2.用于細胞株的長期保存。
3.科研高校,細胞株凍存。
4.醫(yī)院樣本庫細胞樣品保存
使用方法:
1. 凍存前準備
1)要求凍存細胞在對數(shù)生長周期,存活率大于90%
2)計算細胞密度,一般要求在1-3×106cells/ml
2. 細胞凍存過程
1)將要凍存的細胞懸液,進行細胞計數(shù),計數(shù)后離心,800rpm,2min即可
2)棄去上清,將無血清凍存液緩慢加入離心后的細胞沉淀中,吹打混勻,根據(jù)需要分裝凍存管,建議500μl-1000μl一管。
直接放入-80℃冰箱保存,約24小時候后轉入液氮罐中長期保存。
3. 細胞復蘇過程
1)提前開啟水浴鍋,溫度調節(jié)到37℃。
2)將凍存的細胞冷凍管從液氮中取出,迅速置于水浴鍋中融化,盡量1min融化,時間越短,對細胞影響越小。
3)將融化后的含細胞的冷凍保存液迅速吸出置于新鮮培養(yǎng)基中充分混勻,
(如細胞冷凍保存液為500μl,則加入到5ml新鮮培養(yǎng)基中,如細胞冷凍保存液位1ml,則加入10ml新鮮培養(yǎng)基中。)
4)混勻后立即離心,800 rpm,3min即可,離心結束后棄上清,加入預溫的新鮮培養(yǎng)液。
5)混勻后分瓶置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
備注:
1. 本產品僅供研究使用。
2. 無特殊毒性,按普通化學品處理。如果不慎與眼、皮膚和衣物接觸,請立刻用大量清水沖洗,情況嚴重者請及時就醫(yī)。
關鍵字: 無血清細胞凍存液/凍存液;
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