油紅O染色試劑盒
產(chǎn)品編號 | 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
Oms-01 | 固定液（4%多聚甲醛） | 50 ml | -20 ℃ |
油紅 O 染液（存儲液） | 30 ml | RT 避光保存 |
蘇木素染液（Mayer） | 50 ml | 4 ℃ 避光保存 |
說明書 | 1 份 |
一、產(chǎn)品簡介。
油紅 O 染液的主要成份 1-［2,5-二甲基-4-(2,5-二甲基苯偶氮)苯偶氮］-2 萘酚對脂肪具有很強(qiáng)的親和性，結(jié)合細(xì)胞或組織中的脂肪后使脂滴呈現(xiàn)橙黃色至紅色（因脂肪含量而異），隨后的蘇木素染液使細(xì)胞核染成藍(lán)色，進(jìn)而分析細(xì)胞或組織中脂滴的多少與分布。
二、運(yùn)輸與存儲條件。
本產(chǎn)品低溫運(yùn)輸，并按各組份保存條件分開保存，有效期 12 個月。
三、特點與優(yōu)勢。
1. 本試劑可以對細(xì)胞或組織中的脂肪進(jìn)行染色，脂滴染色清晰。
2. 本產(chǎn)品為即用型試劑，操作方便，快速。
四、自備試劑與耗材。
60%異丙醇、去離子水（ddH2O）、PBS
五、使用說明。
1. 油紅 O 工作液配制。計算需要的油紅 O 工作液體積，將油紅 O 存儲液與ddH2O 按照 3:2 的比例混勻，室溫靜置 10 min，過濾，備用。
2. 細(xì)胞染色。
1) 細(xì)胞培養(yǎng)與成脂誘導(dǎo)。HepG2 或其它細(xì)胞傳代后接種到 6 孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，24 h 后細(xì)胞密度達(dá)到 70%左右，加入 1 mM 的游離脂肪酸（FFA）處理，誘導(dǎo)脂肪生成。
2) 成脂效果檢測。成脂誘導(dǎo) 24 h，顯微鏡下觀察，若細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)透亮的脂滴，說明成脂誘導(dǎo)實驗成功。
3) 固定。棄細(xì)胞培養(yǎng)液，PBS 洗滌 1-2 次，加入 1 ml 固定液（4%多聚甲醛）室溫固定 20-30 min，棄固定液，ddH2O 洗滌 2 次。
4) 60%異丙醇潤洗。加入 60%異丙醇，1 ml/孔，靜置 5 min，棄異丙醇。
5) 油紅 O 染色。加入油紅 O 工作液，1 ml/孔，室溫染色10-20 min。棄油紅 O 染液，ddH2O 洗滌至無多余染液。
6) 蘇木素染色。加入蘇木素染液，1 ml/孔，室溫染色 2-5 min，棄染液，ddH2O 洗滌至無多余染液。
7) 加入 ddH2O 或 PBS，1 ml/孔，顯微鏡下觀察并拍照。
3. 組織切片染色。
1) 冰凍切片（8-10 μm）置于載玻片上，晾干。
2) 固定。將冰凍切片置于固定液中固定20-30 min，ddH2O 洗滌 3 次。
3) 60%異丙醇潤洗。將冰凍切片置于60%異丙醇中，室溫靜置 5 min，撈出，稍微晾干。
4) 油紅 O 染色。將冰凍切片置于油紅 O 工作液中，室溫染色 20-30 min。撈出，ddH2O 洗滌至無多余染液。
5) 蘇木素染色。將冰凍切片置于蘇木素染液中，室溫靜置 2-5 min，撈出，ddH2O 洗滌至無多余染液。
6) 滴加 ddH2O 或 50%甘油封片，顯微鏡下觀察并拍照。
六、注意事項。
1. 油紅 O 工作液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配，不宜久放，容易失效。
2. 油紅 O 工作液盡量過濾一下，以免沉淀影響實驗結(jié)果。
3. 若室內(nèi)溫度太低，油紅 O 工作液可以在 60 ℃水浴鍋中孵育 10-30 min，增強(qiáng)染色效果。
4. 細(xì)胞和組織切片不宜用乙醇固定，影響油紅 O 染色效果。
5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
關(guān)鍵字： 油紅O染色試劑盒;油紅O;蘇木素;
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