"CCC-HIE-2:人胚胎腸粘膜來源復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MA-104細胞類似產(chǎn)品：：Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞

H-661細胞類似產(chǎn)品：：PCI-4M細胞、MKN7細胞、HCC1359細胞

NCIH2023細胞類似產(chǎn)品：：CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞

HO-1-N-1細胞類似產(chǎn)品：：PGLH7細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、HUSMC細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：胚胎；腸粘膜

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

NIH:OVCAR-5細胞類似產(chǎn)品：：Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞

Mahlavu細胞類似產(chǎn)品：：Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞

293c18細胞類似產(chǎn)品：：NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

IFRS1細胞類似產(chǎn)品：：SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞

675T細胞類似產(chǎn)品：：L-428細胞、VM-CUB-I細胞、FRTL 5細胞

ECC1細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1 Subclone 24細胞、GM-3573細胞、DKMG細胞

NCIH1650細胞類似產(chǎn)品：：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞

A-253細胞類似產(chǎn)品：：RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞

CEL細胞類似產(chǎn)品：：FCCH1024細胞、U266S細胞、H-2342細胞

SGC7901/DDP細胞類似產(chǎn)品：：MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞

OCI-AML4細胞類似產(chǎn)品：：HCC-94細胞、F36P細胞、Colo320細胞

H2052_MM細胞類似產(chǎn)品：：SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞

Alexander cells細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞

LK 2細胞類似產(chǎn)品：：MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞

PA I細胞類似產(chǎn)品：：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞

PSN1細胞類似產(chǎn)品：：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞

HCC-1954BL細胞類似產(chǎn)品：：Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞

HEK293-F細胞類似產(chǎn)品：：P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞

NK-92.05細胞類似產(chǎn)品：：32D-Cl3細胞、H1573細胞、NCI-H146細胞

IBMF-7細胞類似產(chǎn)品：：HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞

P815細胞類似產(chǎn)品：：SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞

P3JHR1細胞類似產(chǎn)品：：CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞

H-548細胞類似產(chǎn)品：：HHL-5細胞、BMSC/hBMSCs細胞、HR8348細胞

MGC803細胞類似產(chǎn)品：：A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞

MIA PaCa-2細胞類似產(chǎn)品：：NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞

NCIH2172細胞類似產(chǎn)品：：MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞

M059J細胞類似產(chǎn)品：：Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞

CCC-HIE-2:人胚胎腸粘膜來源復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

NCI-H810細胞類似產(chǎn)品：：ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞

BI-Mel細胞類似產(chǎn)品：：KHYG-1細胞、SkChA1細胞、SW.620細胞

Li-7細胞類似產(chǎn)品：：NCTC clone 929細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、VM-CUB-I細胞

3T3NIH細胞類似產(chǎn)品：：LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞

OVCAR 432細胞類似產(chǎn)品：：ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞

OCI-Ly03細胞類似產(chǎn)品：：L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞

HSC6細胞類似產(chǎn)品：：HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞

RPMI 8226細胞類似產(chǎn)品：：LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞

OCI-Ly01細胞類似產(chǎn)品：：Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞

HSC1細胞類似產(chǎn)品：：PC 61 5.3細胞、HLMVEC細胞、HT1376細胞

L-cells細胞類似產(chǎn)品：：UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞

RH7777細胞類似產(chǎn)品：：KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞

CAL-78細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞

NCIH1781細胞類似產(chǎn)品：：Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞

TE 354.T細胞類似產(chǎn)品：：NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞

GM 2132細胞類似產(chǎn)品：：GM04154B細胞、GI-1細胞、EFM-192A細胞

OVCA 433細胞類似產(chǎn)品：：Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞

NTERA2D1細胞類似產(chǎn)品：：MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞

Leukemic 1210細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞

Leukemia L1210細胞類似產(chǎn)品：：Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞

SNU-638細胞類似產(chǎn)品：：Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞

HEK293細胞類似產(chǎn)品：：U-343-MG細胞、HIMEC細胞、Murine Carcinoma-38細胞

HTR8svn細胞類似產(chǎn)品：：HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞

KYSE 510細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞

Meat Animal Research Center-145細胞類似產(chǎn)品：：Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞

KG-1a細胞類似產(chǎn)品：：HVSMC細胞、ROS17/28細胞、QG-56細胞

CL-11細胞類似產(chǎn)品：：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞

HT-1376細胞類似產(chǎn)品：：SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞

KLN-205細胞類似產(chǎn)品：：RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞

SKCO-1細胞類似產(chǎn)品：：FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞

VeroE6細胞類似產(chǎn)品：：HANK細胞、SF 767細胞、A-20細胞

NGEC細胞類似產(chǎn)品：：Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞

RPMI7666細胞類似產(chǎn)品：：MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞

SUM-52細胞類似產(chǎn)品：：AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞

32D clone 3細胞類似產(chǎn)品：：A875細胞、MDA231-LM2細胞、N-9細胞

ABC1細胞類似產(chǎn)品：：Hs-852-T細胞、BT483細胞、WEHI 164 TC細胞

Balb/c3T3細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-SF 21AE細胞、NCI-H-128細胞、EC-GI細胞

ECC1細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1 Subclone 24細胞、H838細胞、NCI-H1666細胞

H-2330細胞類似產(chǎn)品：：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞

MSTO-211 H細胞類似產(chǎn)品：：H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞

AHH1細胞類似產(chǎn)品：：GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞

AE 1201細胞類似產(chǎn)品：：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞

Chinese Hamster Ovary細胞類似產(chǎn)品：：Hs934T細胞、SKBR-3細胞、MGC-803細胞

PA-TU-8988S細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2286細胞、OVCA 420細胞、MDA1386細胞

CRFK細胞類似產(chǎn)品：：TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞

KM12 SM細胞類似產(chǎn)品：：Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞

FCCH1024細胞類似產(chǎn)品：：751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞

Vertebral Cancer of the Prostate細胞類似產(chǎn)品：：CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞

3T3-Swiss細胞類似產(chǎn)品：：SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞

TERT-RPE1細胞類似產(chǎn)品：：HT-55細胞、GM00637I細胞、H4-II-E細胞

SHI1細胞類似產(chǎn)品：：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞

OLN-93細胞類似產(chǎn)品：：SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞

NFS60細胞類似產(chǎn)品：：HUT-125細胞、PLC PRF 5細胞、P1-Raji細胞

NCI-H774細胞類似產(chǎn)品：：UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞

RPMI8226/S細胞類似產(chǎn)品：：HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞

OCI-LY-10細胞類似產(chǎn)品：：Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞

TGW細胞類似產(chǎn)品：：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞

D341MD細胞類似產(chǎn)品：：SHI-1細胞、Verda reno細胞、COLO-320-HSR細胞

D341MD細胞類似產(chǎn)品：：SHI-1細胞、Verda reno細胞、COLO-320-HSR細胞

U-2932細胞類似產(chǎn)品：：Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞

HRA 19細胞類似產(chǎn)品：：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞

BT-B細胞類似產(chǎn)品：：HET1A細胞、Eph4 1424細胞、G-292 clone A141B1細胞

ACHN細胞類似產(chǎn)品：：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞

MB468細胞類似產(chǎn)品：：Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞

H-1975細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞

Fu97細胞類似產(chǎn)品：：KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞

HPAF-I細胞類似產(chǎn)品：：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞

Mono Mac 1細胞類似產(chǎn)品：：BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞

C-Lu-65細胞類似產(chǎn)品：：CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞

GDM-1細胞類似產(chǎn)品：：MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞

Calu 6細胞類似產(chǎn)品：：LAN6細胞、H220細胞、K299細胞

SW 403細胞類似產(chǎn)品：：NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞

TE-85 clone 5細胞類似產(chǎn)品：：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞

PNT-1A細胞類似產(chǎn)品：：SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞

REC細胞類似產(chǎn)品：：JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞

SHP-77細胞類似產(chǎn)品：：NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞

YD38細胞類似產(chǎn)品：：AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞

MKN-45細胞類似產(chǎn)品：：SHSY-5Y細胞、HPB/ALL細胞、MCF-7細胞

HCC78細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞

P3HR-1細胞類似產(chǎn)品：：CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞

LS 174 T細胞類似產(chǎn)品：：WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞

BE(2)-M17細胞類似產(chǎn)品：：H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞

CCC-HIE-2:人胚胎腸粘膜來源復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

GM3569細胞類似產(chǎn)品：：P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞

EFM-192C細胞類似產(chǎn)品：：C-33A細胞、MDAPC2B細胞、293-H細胞

SW-13細胞類似產(chǎn)品：：B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞

HT 144細胞類似產(chǎn)品：：CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞

NCIH1435細胞類似產(chǎn)品：：CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞

Panc-03.27細胞類似產(chǎn)品：：COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞

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