"F81:貓腎復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

有一些細胞是數(shù)量多一點比較HAO生長，生長狀態(tài)也比較HAO。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較HAO，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較HAO。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不HAO的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不HAO，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得HAO的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Ketr3細胞類似產(chǎn)品：：HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞

DMS 114細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB175VII細胞、BrCL12細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞

HFF1細胞類似產(chǎn)品：：BNL 1ME A.7R.1細胞、MB39細胞、H295R-S1細胞

MILE SVEN1細胞類似產(chǎn)品：：3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：腎；自發(fā)永生；雌性

F81:貓腎復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

BE(2)M17細胞類似產(chǎn)品：：Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞

Ocular Choroidal Melanoma-1細胞類似產(chǎn)品：：XuanWei Lung Cancer-05細胞、A375-SM細胞、CHP 212細胞

HuH6細胞類似產(chǎn)品：：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴模@種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

F81:貓腎復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復(fù)吹打。

HTR8細胞類似產(chǎn)品：：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞

RCK8細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞

PCI:SG231細胞類似產(chǎn)品：：NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞

KP-2細胞類似產(chǎn)品：：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞

RPMI1788細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞

COLO-HSR細胞類似產(chǎn)品：：H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞

PC615.3細胞類似產(chǎn)品：：HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞

PT67細胞類似產(chǎn)品：：CWR22Rv1細胞、OCILY3細胞、CCD841CoN細胞

H69細胞類似產(chǎn)品：：KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞

GP2d細胞類似產(chǎn)品：：CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞

C2BBe 1細胞類似產(chǎn)品：：KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞

hA549細胞類似產(chǎn)品：：MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞

SKRC-52細胞類似產(chǎn)品：：VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞

A549/DDP細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞

Medical Research Council cell strain-9細胞類似產(chǎn)品：：NCIH441細胞、T24(ECV304)細胞、H4-II-E-C3細胞

PaTu-8988s細胞類似產(chǎn)品：：8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞

PaTu-8988s細胞類似產(chǎn)品：：8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞

L M (TK-)細胞類似產(chǎn)品：：UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞

SUP-B1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞

MCF-7/ADR-RES細胞類似產(chǎn)品：：PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞

NEC8細胞類似產(chǎn)品：：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞

T HEECs細胞類似產(chǎn)品：：N1E-115細胞、NALM 6細胞、SHG-44細胞

MT4細胞類似產(chǎn)品：：B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞

HCC-1171細胞類似產(chǎn)品：：MCF-10A細胞、LNCaP.FGC細胞、FDC-P1細胞

F81:貓腎復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

K-562細胞類似產(chǎn)品：：GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞

NB1-RGB細胞類似產(chǎn)品：：D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞

KYSE270細胞類似產(chǎn)品：：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞

SKml2細胞類似產(chǎn)品：：P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞

NPA87細胞類似產(chǎn)品：：DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞

NCIH2085細胞類似產(chǎn)品：：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞

SK-Hep1細胞類似產(chǎn)品：：Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞

CEM-CCRF (CAMR)細胞類似產(chǎn)品：：H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞

5-8F細胞類似產(chǎn)品：：Hs852細胞、TE1細胞、NCI-H1417細胞

U-343 MG細胞類似產(chǎn)品：：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞

X63-Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞

526-mel細胞類似產(chǎn)品：：MMAc-Serum Free細胞、LLC-MK2細胞、JROECL 19細胞

HONE-1細胞類似產(chǎn)品：：PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞

BEAS2B細胞類似產(chǎn)品：：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞

CHP126細胞類似產(chǎn)品：：HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞

C2C12細胞類似產(chǎn)品：：OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞

NK-92細胞類似產(chǎn)品：：WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞

Hca-F細胞類似產(chǎn)品：：ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞

ACCM細胞類似產(chǎn)品：：Rat Skin 1細胞、143B細胞、SW626細胞

WiDr細胞類似產(chǎn)品：：HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞

HcaF細胞類似產(chǎn)品：：H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞

HcaF細胞類似產(chǎn)品：：H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞

HCC-1187細胞類似產(chǎn)品：：High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞

YAC-1細胞類似產(chǎn)品：：THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞

95D細胞類似產(chǎn)品：：OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞

NB19-RIKEN細胞類似產(chǎn)品：：MODE-K細胞、NCI-H2342細胞、IPEC-J2細胞

293細胞類似產(chǎn)品：：NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞

BE2C細胞類似產(chǎn)品：：H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞

MT-4細胞類似產(chǎn)品：：HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞

X63細胞類似產(chǎn)品：：MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞

NCI-H2291細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞

SY5Y細胞類似產(chǎn)品：：DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞

Tn-5細胞類似產(chǎn)品：：MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞

B16 BL6細胞類似產(chǎn)品：：KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞

PANC-03-27細胞類似產(chǎn)品：：hTERT-HME-1細胞、G 401細胞、HEK.EBNA細胞

hTERT-RPE細胞類似產(chǎn)品：：NPA'87細胞、X63-Ag8-653細胞、NCI-446細胞

SNU-719細胞類似產(chǎn)品：：HcerEpic細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HCC1954-BL細胞

PCI:SG231細胞類似產(chǎn)品：：NCTC-1469細胞、Tb 1-Lu細胞、SW-1417細胞

NCI-H1876細胞類似產(chǎn)品：：H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞

R 1610細胞類似產(chǎn)品：：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞

SCC9細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2135細胞、CCD-841-CoTr細胞、NIH:OVCAR-10細胞

LNCaP FGC細胞類似產(chǎn)品：：H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞

A-549細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB468細胞、HCC1937細胞、P30-OHK細胞

HRVEC細胞類似產(chǎn)品：：CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞

Metastatic Variant 522細胞類似產(chǎn)品：：ZR-75-30細胞、MV3細胞、MKN-74細胞

HS0578T細胞類似產(chǎn)品：：L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞

B-3細胞類似產(chǎn)品：：COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞

GM-346細胞類似產(chǎn)品：：OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞

aTC1-6細胞類似產(chǎn)品：：WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞

Pt-K2細胞類似產(chǎn)品：：MDA 231-LM2-4175細胞、HFT-8810細胞、HKF細胞

FF-WT-BJ細胞類似產(chǎn)品：：hTERT-HPNE細胞、R 2 C細胞、H-4細胞

AM-38細胞類似產(chǎn)品：：NRK52E細胞、EBNA-293細胞、HN-6細胞

Mouse Forestomach Carcinoma細胞類似產(chǎn)品：：MCA 205細胞、GM00346B細胞、Capan-1細胞

STO細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞

Okayama University Medical School-27細胞類似產(chǎn)品：：EHEB細胞、HT 1080.T細胞、2008細胞

SK-N-MC細胞類似產(chǎn)品：：Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞

SW 1990細胞類似產(chǎn)品：：MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞

H727細胞類似產(chǎn)品：：OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞

H727細胞類似產(chǎn)品：：OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞

RPMI-1788細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞

Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞類似產(chǎn)品：：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞

52PE細胞類似產(chǎn)品：：Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞

NCI/ADR-RES細胞類似產(chǎn)品：：FM-88細胞、DC 2.4細胞、L-cell細胞

Panc3_27細胞類似產(chǎn)品：：PG13細胞、Hs 746.T細胞、SVG p12細胞

PLA-801C細胞類似產(chǎn)品：：FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞

Bat lung細胞類似產(chǎn)品：：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞

JHH7細胞類似產(chǎn)品：：TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞

NB-4細胞類似產(chǎn)品：：NCI-HUT-125細胞、HCC-1438細胞、HT clone H9細胞

CoCL3細胞類似產(chǎn)品：：H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞

ATC241細胞類似產(chǎn)品：：HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞

HMrSV5細胞類似產(chǎn)品：：CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞

KTCTL-140細胞類似產(chǎn)品：：C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞

MADB-106細胞類似產(chǎn)品：：MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞

1E8-H細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 7666細胞、RBSMC細胞、LNCaP細胞

CMECs細胞類似產(chǎn)品：：H-1573細胞、JHH2細胞、mREC細胞

NCI-H1666細胞類似產(chǎn)品：：Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞

WM115mel細胞類似產(chǎn)品：：Panc203細胞、HTori-3.1細胞、UCLA RO-81A-1細胞

KRC-Y細胞類似產(chǎn)品：：Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞

MXI細胞類似產(chǎn)品：：Earles's cells細胞、HET-1A細胞、HepG2-luc細胞

H1688細胞類似產(chǎn)品：：T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞

SCL II細胞類似產(chǎn)品：：IBRS-2細胞、HO-8910細胞、J774.A1細胞

Z310細胞類似產(chǎn)品：：NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞

F81:貓腎復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

HT-144細胞類似產(chǎn)品：：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞

B16細胞類似產(chǎn)品：：Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞

OKT3細胞類似產(chǎn)品：：TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞

RCC-10細胞類似產(chǎn)品：：SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞

RINm5F細胞類似產(chǎn)品：：AMO1細胞、U138MG細胞、SKHEP-1細胞

PK15細胞類似產(chǎn)品：：WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞

"