"PL45:人胰腺導(dǎo)管腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

有一些細胞是數(shù)量多一點比較HAO生長，生長狀態(tài)也比較HAO。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較HAO，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較HAO。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不HAO的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不HAO，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得HAO的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

WML2細胞類似產(chǎn)品：：UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞

OCI-Ly18細胞類似產(chǎn)品：：HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞

MFD-1細胞類似產(chǎn)品：：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞

MDA-MB435細胞類似產(chǎn)品：：BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

PL45:人胰腺導(dǎo)管腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

HSC-3細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞

Psi2-DAP細胞類似產(chǎn)品：：Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞

H1650細胞類似產(chǎn)品：：H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞

細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在GAO處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，Zui后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。GAO壓消毒：包裝HAO的器皿裝入GAO壓鍋內(nèi)蓋HAO蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。GAO壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過GAO時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過GAO超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關(guān)。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄Zui佳消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。

JG細胞類似產(chǎn)品：：SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞

NG-108-15細胞類似產(chǎn)品：：TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞

Vertebral Cancer of the Prostate細胞類似產(chǎn)品：：CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞

hTERT-HME-1細胞類似產(chǎn)品：：293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞

H-292細胞類似產(chǎn)品：：WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞

KMB17細胞類似產(chǎn)品：：Verda reno細胞、CNE-2Z細胞、801-D細胞

MLE-12細胞類似產(chǎn)品：：MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞

C3H/10T1/2 CL8細胞類似產(chǎn)品：：MT4細胞、NUGC3細胞、MCF.10A細胞

PCI-4.2細胞類似產(chǎn)品：：CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞

Nb 2細胞類似產(chǎn)品：：3T3F442A細胞、A-549細胞、G401細胞

NCI-H2405細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞

CHO Lec1細胞類似產(chǎn)品：：Caco-2/BBe細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、A375S2細胞

H4-II-EC3細胞類似產(chǎn)品：：SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞

Michigan Cancer Foundation-12F細胞類似產(chǎn)品：：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞

CA922細胞類似產(chǎn)品：：MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞

Wien-133細胞類似產(chǎn)品：：NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞

Wien-133細胞類似產(chǎn)品：：NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞

HDLM-2細胞類似產(chǎn)品：：MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞

CoC1細胞類似產(chǎn)品：：D324細胞、L540細胞、74Int細胞

KRCY細胞類似產(chǎn)品：：MDCK-II細胞、Ly18細胞、MDA231-LM2細胞

NCIH2286細胞類似產(chǎn)品：：IHH-4細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、HCT/Taxo1細胞

HNE2細胞類似產(chǎn)品：：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞

Huh7.5細胞類似產(chǎn)品：：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞

BAC1.2F5細胞類似產(chǎn)品：：LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞

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EL4細胞類似產(chǎn)品：：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞

KAT-5細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞

H510A細胞類似產(chǎn)品：：DHL-5細胞、PLB 985細胞、COLO-741細胞

SUM-159細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞

HcerEpic細胞類似產(chǎn)品：：H-596細胞、Hepa1-6細胞、hUC-MSC細胞

NCI-H719細胞類似產(chǎn)品：：Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞

KM932細胞類似產(chǎn)品：：T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞

HEL9217細胞類似產(chǎn)品：：Kato-III細胞、H1836細胞、TE 85.T細胞

SU-DH-L5細胞類似產(chǎn)品：：PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞

NTera-2D1細胞類似產(chǎn)品：：HuH7細胞、NALM-6-M1細胞、TKB1細胞

BC-019細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞

SK-MES1細胞類似產(chǎn)品：：G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞

tdott細胞類似產(chǎn)品：：PANC0813細胞、PC-3M-2B4細胞、U-2932細胞

CAL-120細胞類似產(chǎn)品：：Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞

GC9811-P細胞類似產(chǎn)品：：Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞

SNU-739細胞類似產(chǎn)品：：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞

A101D細胞類似產(chǎn)品：：SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞

OVCAR 4細胞類似產(chǎn)品：：TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞

C-32細胞類似產(chǎn)品：：EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞

HL-7702細胞類似產(chǎn)品：：Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞

KLE細胞類似產(chǎn)品：：Chinese Hamster Ovary細胞、T-CAM2細胞、Madison lung細胞

B16 F1細胞類似產(chǎn)品：：JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞

D-283細胞類似產(chǎn)品：：NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞

Mono-Mac-6細胞類似產(chǎn)品：：KP-N-NS細胞、OSA細胞、P 815細胞

MSCs（mUCMSCs）細胞類似產(chǎn)品：：NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞

RPMI no. 8226細胞類似產(chǎn)品：：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞

OVISE細胞類似產(chǎn)品：：HCC1954BL細胞、H2087細胞、HM細胞

A-375.S2細胞類似產(chǎn)品：：LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞

MV 4;11細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞

Hs606細胞類似產(chǎn)品：：JHH7細胞、HDMEC細胞、Panc 8.13細胞

SNU423細胞類似產(chǎn)品：：OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞

CPA47細胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞

MLE 12細胞類似產(chǎn)品：：MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞

CC-LP-1細胞類似產(chǎn)品：：HCC-2279細胞、TE-11細胞、HEC1B細胞

KTCTL140細胞類似產(chǎn)品：：H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞

Hs 688(A).T細胞類似產(chǎn)品：：SCC25細胞、WC00097細胞、Mel624細胞

Tokyo Medical and Dental university 8細胞類似產(chǎn)品：：CEK細胞、HEL-299細胞、3T3-F442A細胞

Vertebral Cancer of the Prostate細胞類似產(chǎn)品：：CT26.WT細胞、CCD1095Sk細胞、NCI747細胞

NCIH28細胞類似產(chǎn)品：：SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞

GM00637F細胞類似產(chǎn)品：：TMD-8細胞、H766T細胞、X63-Ag8細胞

SupT1細胞類似產(chǎn)品：：HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞

KYSE-410細胞類似產(chǎn)品：：TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞

HCC-1500細胞類似產(chǎn)品：：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞

K-1735細胞類似產(chǎn)品：：786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞

L 363細胞類似產(chǎn)品：：WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞

GA-10(Clone 4)細胞類似產(chǎn)品：：hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞

A427細胞類似產(chǎn)品：：CCD 841 CoN細胞、SW 954細胞、RH-35細胞

HGBEC細胞類似產(chǎn)品：：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞

hTERT-RPE-1細胞類似產(chǎn)品：：SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞

Det. 562細胞類似產(chǎn)品：：H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞

LTEP-sm 1細胞類似產(chǎn)品：：Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞

Fox/NY細胞類似產(chǎn)品：：ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞

HEL-1細胞類似產(chǎn)品：：SCC 4細胞、Adeno-293細胞、H2052細胞

LNCaP-FGC細胞類似產(chǎn)品：：CORL26細胞、NCI-H250細胞、RA 1細胞

M07e細胞類似產(chǎn)品：：BS-C-1細胞、SW 1271細胞、LTEPsm細胞

HM06.A1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞

B16 melanoma細胞類似產(chǎn)品：：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞

IMR-90細胞類似產(chǎn)品：：LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞

IMR-90細胞類似產(chǎn)品：：LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞

PL 5細胞類似產(chǎn)品：：U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞

Sp 2817細胞類似產(chǎn)品：：RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞

U-343 MG細胞類似產(chǎn)品：：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞

MHCC-LM3細胞類似產(chǎn)品：：C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞

Alpha Mouse Liver 12細胞類似產(chǎn)品：：KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞

RH-35細胞類似產(chǎn)品：：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞

SNU-251細胞類似產(chǎn)品：：NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞

G519細胞類似產(chǎn)品：：NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞

SW-1088細胞類似產(chǎn)品：：CEMO-1細胞、C17細胞、PL45細胞

SK-RC-52細胞類似產(chǎn)品：：SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞

L-6TG細胞類似產(chǎn)品：：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞

TE353.SK細胞類似產(chǎn)品：：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞

EST81細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1954細胞、WB-F344細胞、OVCAR.3細胞

A549ATCC細胞類似產(chǎn)品：：H-1435細胞、SJCRH30細胞、RGB細胞

T-98G細胞類似產(chǎn)品：：COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞

H-64細胞類似產(chǎn)品：：IOSE-80細胞、RDES細胞、HPASMC細胞

Detroit-562細胞類似產(chǎn)品：：T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞

RGC-5細胞類似產(chǎn)品：：B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞

COLO 738細胞類似產(chǎn)品：：T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞

MT4細胞類似產(chǎn)品：：B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞

SK Mel 24細胞類似產(chǎn)品：：Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞

MKN 45細胞類似產(chǎn)品：：hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞

LN 229細胞類似產(chǎn)品：：RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞

PL45:人胰腺導(dǎo)管腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Hs-746T細胞類似產(chǎn)品：：NOZAWA細胞、CCRF/CEM-C7細胞、EAhy926細胞

A 549細胞類似產(chǎn)品：：HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞

TMK1細胞類似產(chǎn)品：：HMEC細胞、NCIH1819細胞、RSC-96細胞

Panc 3.27細胞類似產(chǎn)品：：J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞

PC 61 5.3細胞類似產(chǎn)品：：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞

SUIT 2細胞類似產(chǎn)品：：K562/ADR細胞、P-3J細胞、SUDHL5細胞

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