"3T3-J2 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠胚胎成纖維細胞
細胞背景資料:胚胎;成纖維細胞
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在GAO壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質,37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內,再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉GAO鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細胞生長:貼壁
NCI-H838細胞類似產品::hTERT-RPE-1細胞、R1610細胞、Okayama University Medical School-23細胞
IMCD-3細胞類似產品::NCI-H2009細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、LIM 1215細胞
MADB 106細胞類似產品::HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞
HCC366細胞類似產品::L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞
LL/2 (LLC1)細胞類似產品::HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞
3T3-J2 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠胚胎成纖維細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,ZuiHAO選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
UMUC1細胞類似產品::HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞
Walker/LLC-WRC 256細胞類似產品::GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞
PNT1A細胞類似產品::RPE-1細胞、HCCLM6細胞、HLEC-SRA 01/04細胞
HT 1376.T細胞類似產品::U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞
SUM 159PT細胞類似產品::GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
3T3-J2 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠胚胎成纖維細胞
細胞生長特性:貼壁
MDAMB361細胞類似產品::HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞
LNCaP.FGC細胞類似產品::NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞
WM 266-4細胞類似產品::CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞
MC3T3細胞類似產品::P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞
hCMEC/D3細胞類似產品::SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞
SUM149細胞類似產品::KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞
培養(yǎng)細胞真的不難,Zui關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越HAO。另外,要掌握HAO胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,Zui近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做HAO支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候ZuiHAO給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存HAO了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇Zui合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記HAO細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以Zui快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟ZuiHAO使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做HAO記錄是非常非常重要的!還有一個Zui重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做HAO防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
IMCD-3細胞類似產品::NCI-H2009細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、LIM 1215細胞
KP4細胞類似產品::NS653細胞、F9細胞、VP229細胞
TCMK-1細胞類似產品::L-02細胞、LM1細胞、NCIH28細胞
Plaepi 34細胞類似產品::MDA PCa 2b細胞、NBL_S細胞、CA922細胞
G-401細胞類似產品::NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞
RDES-1細胞類似產品::HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞
COLO-684細胞類似產品::DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞
W133細胞類似產品::HN 4細胞、UPCISCC090細胞、Sp2/0細胞
H-510A細胞類似產品::HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞
Madison細胞類似產品::RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞
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Psi2 DAP細胞類似產品::NCIH128細胞、A9(Hamprecht)細胞、ML2細胞
H-735細胞類似產品::P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞
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SUM 102PT細胞類似產品::H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞
NCI-H522細胞類似產品::SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
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KP2細胞類似產品::Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
MDA-MB-134細胞類似產品::OVCA432細胞、Tu212細胞、624-mel細胞
HCC 2185細胞類似產品::H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞
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IMR-90細胞類似產品::LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞
Hs737T細胞類似產品::KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞
EFM-192B細胞類似產品::NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞
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SK ES 01細胞類似產品::MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞
H1734細胞類似產品::H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞
Hela-mock細胞類似產品::LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞
786-O細胞類似產品::P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
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MSB-1細胞類似產品::WEHI3細胞、MC57細胞、NBL-5細胞
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上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。