"BC-020 Cells(贈送Str鑒定報告)|人乳腺癌細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

養(yǎng)了幾年細胞，說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法：１)培養(yǎng)細胞前，可以看看細胞點說明書，包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經足夠了，有的又是別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細胞，就得細心呵護了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉速和時間，每天都要去看一下細胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況；４)凍存細胞復蘇后第二天ZuiHAO更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細胞Zui大的教訓：不能偷懶!細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。１)不管買的細胞、惠贈的細胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。

細胞生長：貼壁

HCMEC(BL12-H)細胞類似產品：：OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞

H1563細胞類似產品：：GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞

J-774A.1細胞類似產品：：CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞

HCE細胞類似產品：：HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞

UCH1細胞類似產品：：HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞

BC-020 Cells(贈送Str鑒定報告)|人乳腺癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

Tu686細胞類似產品：：UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞

SNU407細胞類似產品：：NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞

SNU407細胞類似產品：：NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞

MS-751細胞類似產品：：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞

H7721細胞類似產品：：OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

BC-020 Cells(贈送Str鑒定報告)|人乳腺癌細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

U-343 MG細胞類似產品：：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞

Leghorn Male Hepatoma cell line細胞類似產品：：2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞

NCIH1838細胞類似產品：：High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞

RSC-364細胞類似產品：：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞

mRTEC細胞類似產品：：MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞

HCC2279細胞類似產品：：HuCC-T1細胞、NCIH446細胞、LIM-1215細胞

細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提GAO血清濃度(ZuiGAO不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性Zui強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不HAO的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！

3T3-L1 ad細胞類似產品：：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞

H1385細胞類似產品：：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞

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RL細胞類似產品：：SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞

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RPMI no. 8226細胞類似產品：：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞

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MDA-MB435細胞類似產品：：BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞

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GL-261細胞類似產品：：Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞

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SW 579細胞類似產品：：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞

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AC16 [Human hybrid]細胞類似產品：：SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞

HBE 135-E6/E7細胞類似產品：：FHL-124細胞、SCC 9細胞、HPMC細胞

CZ-1細胞類似產品：：ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞

CAL 12細胞類似產品：：PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞

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BC3H1細胞類似產品：：T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞

GOS-3細胞類似產品：：SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞

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RH8994細胞類似產品：：SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞

U-266 AR1細胞類似產品：：DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞

Raji細胞類似產品：：VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞

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8226細胞類似產品：：HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞

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SW 780細胞類似產品：：Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞

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PC 61細胞類似產品：：CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞

BC-020 Cells(贈送Str鑒定報告)|人乳腺癌細胞

Sp2/0細胞類似產品：：H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞

Potorous tridactylus Kidney 2細胞類似產品：：KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞

MC3T3-E1 Subclone 4細胞類似產品：：RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞

A431細胞類似產品：：HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞

Daoy細胞類似產品：：KMB-17細胞、UMRC-2細胞、Rat-2細胞

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CWR22-Rv1細胞類似產品：：P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞

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